CAJ | 학술논문

目的观察在移植人造血干细胞的山羊肝脏组织中是否有人特异蛋白的表达.方法从脐带血中获取人造血干/祖细胞,移植入胎山羊体内,产生嵌合体山羊;取4头出生后10个月的嵌合体山羊的肝脏,应用免疫组化技术检测其是否有人增殖细胞核抗原(PCNA)和肝细胞特异性抗原(HSA)的表达,并用FACS检测山羊肝细胞标本中是否存在有人HSA阳性细胞;应用RT-PCR技术分析嵌合体山羊的肝组织是否有人特异的肝细胞核因子(hHNF-3β)和人血清白蛋白(hALB)mRNA表达;应用荧光原位杂交(FISH)技术鉴定嵌合体山羊肝组织的间期细胞核是否存在特异于人17号染色体基因的杂交信号.结果在受体山羊血循环中发现有人血细胞嵌合,证明移植成功.受体山羊肝脏切片中发现有人PCNA和HSA表达,但对照组未见;FACS分析结果显示在嵌合体山羊的肝脏组织中有表达人HSA的阳性细胞;RT-PCR结果表明嵌合体山羊肝细胞表达hHNF-3β和hALB mRNA;FISH结果显示嵌合体山羊肝组织的个别间期细胞核具有两个人特异的杂交信号.结论人造血干细胞移植于胎山羊后可以产生嵌合型肝脏,其在受体羊肝组织中生长和扩增,分化成人的肝细胞,并具备了人肝细胞特异性的转录活性.
목적관찰재이식인조혈간세포적산양간장조직중시부유인특이단백적표체.방법종제대혈중획취인조혈간/조세포,이식입태산양체내,산생감합체산양;취4두출생후10개월적감합체산양적간장,응용면역조화기술검측기시부유인증식세포핵항원(PCNA)화간세포특이성항원(HSA)적표체,병용FACS검측산양간세포표본중시부존재유인HSA양성세포;응용RT-PCR기술분석감합체산양적간조직시부유인특이적간세포핵인자(hHNF-3β)화인혈청백단백(hALB)mRNA표체;응용형광원위잡교(FISH)기술감정감합체산양간조직적간기세포핵시부존재특이우인17호염색체기인적잡교신호.결과재수체산양혈순배중발현유인혈세포감합,증명이식성공.수체산양간장절편중발현유인PCNA화HSA표체,단대조조미견;FACS분석결과현시재감합체산양적간장조직중유표체인HSA적양성세포;RT-PCR결과표명감합체산양간세포표체hHNF-3β화hALB mRNA;FISH결과현시감합체산양간조직적개별간기세포핵구유량개인특이적잡교신호.결론인조혈간세포이식우태산양후가이산생감합형간장,기재수체양간조직중생장화확증,분화성인적간세포,병구비료인간세포특이성적전록활성.