CAJ | 학술논문

目的:研究内皮素(Endothelin, ET)A型受体(ETA)反义寡核苷酸(Oligonucleotide, OGN)对内皮细胞(Endothelial cells, ECs)条件培养液(ECCM)刺激的人大隐静脉(human saphenous vein, HSV)血管平滑肌细胞(Vascular smooth muscle cells, VSMCs)增殖的影响.方法:分离、培养HSV的ECs 和VSMCs.收集ECCM,分别用正常的DMEM(Dulbecco's ModIfied Eagle medium)、含ET-1的DMEM、ECCM 和加入Phophoramidon(ET-1转化酶抑制剂)的ECCM培养VSMCs.以放射免疫法测定ECs培养基中ET-1水平;分别采用放射受体结合分析法和四唑盐(MTT)比色实验检测ETA蛋白表达和细胞的增殖.结果:ETA-OGN (15 μmol/L) 以时间依赖的方式抑制ETA表达.12～48 h HSV的ECs培养上清液ET-1水平呈现上升的趋势,48h达到高峰.ECCM显著刺激VSMCs增殖(P<0.01),ET-1能够模拟ECCM的促增殖作用.在ECCM中加入Phosphorimidon,不能使ECCM 的促增殖效应消失(P<0.05).ETA-OGN (15 μmol/L)对无血清正常的DMEM培养基培养的VSMCs增殖没有显著影响,但显著抑制ECCM和ET-1的促增殖作用(P<0.01 vs ECCM).结论:ECs通过分泌包括ET-1在内的多种因子促进VSMCs增殖,其中ET-1发挥主要的作用.ETA-OGN抑制ECs的促增殖作用,减弱VSMCs增殖,可能是其防治血管移植术后狭窄的重要机制.
목적:연구내피소(Endothelin, ET)A형수체(ETA)반의과핵감산(Oligonucleotide, OGN)대내피세포(Endothelial cells, ECs)조건배양액(ECCM)자격적인대은정맥(human saphenous vein, HSV)혈관평활기세포(Vascular smooth muscle cells, VSMCs)증식적영향.방법:분리、배양HSV적ECs 화VSMCs.수집ECCM,분별용정상적DMEM(Dulbecco's ModIfied Eagle medium)、함ET-1적DMEM、ECCM 화가입Phophoramidon(ET-1전화매억제제)적ECCM배양VSMCs.이방사면역법측정ECs배양기중ET-1수평;분별채용방사수체결합분석법화사서염(MTT)비색실험검측ETA단백표체화세포적증식.결과:ETA-OGN (15 μmol/L) 이시간의뢰적방식억제ETA표체.12～48 h HSV적ECs배양상청액ET-1수평정현상승적추세,48h체도고봉.ECCM현저자격VSMCs증식(P<0.01),ET-1능구모의ECCM적촉증식작용.재ECCM중가입Phosphorimidon,불능사ECCM 적촉증식효응소실(P<0.05).ETA-OGN (15 μmol/L)대무혈청정상적DMEM배양기배양적VSMCs증식몰유현저영향,단현저억제ECCM화ET-1적촉증식작용(P<0.01 vs ECCM).결론:ECs통과분비포괄ET-1재내적다충인자촉진VSMCs증식,기중ET-1발휘주요적작용.ETA-OGN억제ECs적촉증식작용,감약VSMCs증식,가능시기방치혈관이식술후협착적중요궤제.