中国实验方剂学杂志
中國實驗方劑學雜誌
중국실험방제학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL TRADITIONAL MEDICAL FORMULAE
2011年
16期
116-119
,共4页
郭文峰%杨伟鹏%王怡薇%王彦礼%胡灿%温鹏%高小玲%陈蔚文
郭文峰%楊偉鵬%王怡薇%王彥禮%鬍燦%溫鵬%高小玲%陳蔚文
곽문봉%양위붕%왕이미%왕언례%호찬%온붕%고소령%진위문
6-姜酚%肽转运载体1%转运功能%环磷酸腺苷
6-薑酚%肽轉運載體1%轉運功能%環燐痠腺苷
6-강분%태전운재체1%전운공능%배린산선감
目的:观察6-姜酚对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响.方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予6-姜酚处理,并设立正常对照组及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,采用Western blot方法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR方法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平.结果:6-姜酚处理组Caco-细胞60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为(6.84±0.46),(8.61±0.54)μmol/孔,高于正常对照组(P<0.05),后者分别为(5.62±0.20)、(6.54±0.54)μmol/孔;6-姜酚与Rp-8-Br-cAMP合用组120 min时点为(6.92±0.67)μmol/孔,明显低于相应时点单用6-姜酚组(P<0.05);6-姜酚处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达增加,PepT1表达与内参GAPDH表达灰度比值6-姜酚组为(0.317±0.022),高于空白对照组(0.220±0.019)(P<0.01);荧光定量PCR结果,6-姜酚能上调Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达,但与cAMP抑制剂合用后该抑制作用被阻断.结论:6-姜酚具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与上调PepT1蛋白及mRNA表达有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系.
目的:觀察6-薑酚對Caco-2細胞肽轉運載體PepT1轉運二肽的能力及其蛋白、mRNA錶達的影響.方法:Caco-2細胞融閤後連續培養28 d後給予6-薑酚處理,併設立正常對照組及cAMP抑製劑對照組,用放射性同位素示蹤技術比較Caco-2細胞轉運二肽化閤物Glycyl-Sarcosine的能力,採用Western blot方法測定Caco-2細胞膜上PepT1蛋白的錶達,熒光定量PCR方法測定PepT1 mRNA(SLC15A1)的錶達水平.結果:6-薑酚處理組Caco-細胞60,120 min時點Glycyl-Sarcosine吸收轉運纍計量分彆為(6.84±0.46),(8.61±0.54)μmol/孔,高于正常對照組(P<0.05),後者分彆為(5.62±0.20)、(6.54±0.54)μmol/孔;6-薑酚與Rp-8-Br-cAMP閤用組120 min時點為(6.92±0.67)μmol/孔,明顯低于相應時點單用6-薑酚組(P<0.05);6-薑酚處理後Caco-2細胞膜PepT1蛋白錶達增加,PepT1錶達與內參GAPDH錶達灰度比值6-薑酚組為(0.317±0.022),高于空白對照組(0.220±0.019)(P<0.01);熒光定量PCR結果,6-薑酚能上調Caco-2細胞SLC15A1 mRNA錶達,但與cAMP抑製劑閤用後該抑製作用被阻斷.結論:6-薑酚具有促進正常培養Caco-2細胞轉運二肽化閤物Glycyl-Sarcosine的作用,該作用可能與上調PepT1蛋白及mRNA錶達有關,該過程調控與胞內第二信使cAMP有一定的關繫.
목적:관찰6-강분대Caco-2세포태전운재체PepT1전운이태적능력급기단백、mRNA표체적영향.방법:Caco-2세포융합후련속배양28 d후급여6-강분처리,병설립정상대조조급cAMP억제제대조조,용방사성동위소시종기술비교Caco-2세포전운이태화합물Glycyl-Sarcosine적능력,채용Western blot방법측정Caco-2세포막상PepT1단백적표체,형광정량PCR방법측정PepT1 mRNA(SLC15A1)적표체수평.결과:6-강분처리조Caco-세포60,120 min시점Glycyl-Sarcosine흡수전운루계량분별위(6.84±0.46),(8.61±0.54)μmol/공,고우정상대조조(P<0.05),후자분별위(5.62±0.20)、(6.54±0.54)μmol/공;6-강분여Rp-8-Br-cAMP합용조120 min시점위(6.92±0.67)μmol/공,명현저우상응시점단용6-강분조(P<0.05);6-강분처리후Caco-2세포막PepT1단백표체증가,PepT1표체여내삼GAPDH표체회도비치6-강분조위(0.317±0.022),고우공백대조조(0.220±0.019)(P<0.01);형광정량PCR결과,6-강분능상조Caco-2세포SLC15A1 mRNA표체,단여cAMP억제제합용후해억제작용피조단.결론:6-강분구유촉진정상배양Caco-2세포전운이태화합물Glycyl-Sarcosine적작용,해작용가능여상조PepT1단백급mRNA표체유관,해과정조공여포내제이신사cAMP유일정적관계.