肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2006年
2期
112-115
,共4页
蔡晓坤%周俊立%林菊生%孙雪梅%薛秀兰%李超
蔡曉坤%週俊立%林菊生%孫雪梅%薛秀蘭%李超
채효곤%주준립%림국생%손설매%설수란%리초
肝肿瘤%PNP/MeP-dR自杀基因系统%转染%基因疗法%HepG2细胞
肝腫瘤%PNP/MeP-dR自殺基因繫統%轉染%基因療法%HepG2細胞
간종류%PNP/MeP-dR자살기인계통%전염%기인요법%HepG2세포
目的:探讨新型嘌呤核苷磷酸化酶/6-甲基嘌呤-2'-脱氧核糖核苷(PNP/MeP-dR)自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用.方法:构建PNP基因真核表达载体pcDNA3.0/PNP,脂质体介导法将其导入HepG2细胞,利用G418筛选获得稳定转染PNP基因的细胞株HepG2/PNP.采用台盼蓝拒染法测绘细胞生长曲线,MTT法和FCM检测细胞对MeP-dR的敏感性及旁观者效应,HPLC检测PNP酶活性.结果:HepG2/PNP细胞对MeP-dR十分敏感,作用4 d后MeP-dR对HepG2/PNP的IC50为4.5 μmol/L,而100 μmol/L的MeP-dR即可最大限度地杀死HepG2/PNP细胞.100 μmol/LMeP-dR作用8 d后,混合细胞中HepG2/PNP比倒仅占5%即可导致所有细胞死亡.HPLC结果显示,PNP基因产物能够将MeP-dR转化为6-MP.结论:PNP/MeP dR系统对肝癌细胞的杀瘤效果明显优于传统的自杀基因系统.本研究为该系统应用于肝癌体内治疗打下基础.
目的:探討新型嘌呤覈苷燐痠化酶/6-甲基嘌呤-2'-脫氧覈糖覈苷(PNP/MeP-dR)自殺基因繫統對肝癌細胞的殺傷作用.方法:構建PNP基因真覈錶達載體pcDNA3.0/PNP,脂質體介導法將其導入HepG2細胞,利用G418篩選穫得穩定轉染PNP基因的細胞株HepG2/PNP.採用檯盼藍拒染法測繪細胞生長麯線,MTT法和FCM檢測細胞對MeP-dR的敏感性及徬觀者效應,HPLC檢測PNP酶活性.結果:HepG2/PNP細胞對MeP-dR十分敏感,作用4 d後MeP-dR對HepG2/PNP的IC50為4.5 μmol/L,而100 μmol/L的MeP-dR即可最大限度地殺死HepG2/PNP細胞.100 μmol/LMeP-dR作用8 d後,混閤細胞中HepG2/PNP比倒僅佔5%即可導緻所有細胞死亡.HPLC結果顯示,PNP基因產物能夠將MeP-dR轉化為6-MP.結論:PNP/MeP dR繫統對肝癌細胞的殺瘤效果明顯優于傳統的自殺基因繫統.本研究為該繫統應用于肝癌體內治療打下基礎.
목적:탐토신형표령핵감린산화매/6-갑기표령-2'-탈양핵당핵감(PNP/MeP-dR)자살기인계통대간암세포적살상작용.방법:구건PNP기인진핵표체재체pcDNA3.0/PNP,지질체개도법장기도입HepG2세포,이용G418사선획득은정전염PNP기인적세포주HepG2/PNP.채용태반람거염법측회세포생장곡선,MTT법화FCM검측세포대MeP-dR적민감성급방관자효응,HPLC검측PNP매활성.결과:HepG2/PNP세포대MeP-dR십분민감,작용4 d후MeP-dR대HepG2/PNP적IC50위4.5 μmol/L,이100 μmol/L적MeP-dR즉가최대한도지살사HepG2/PNP세포.100 μmol/LMeP-dR작용8 d후,혼합세포중HepG2/PNP비도부점5%즉가도치소유세포사망.HPLC결과현시,PNP기인산물능구장MeP-dR전화위6-MP.결론:PNP/MeP dR계통대간암세포적살류효과명현우우전통적자살기인계통.본연구위해계통응용우간암체내치료타하기출.
