CAJ | 학술논문

目的:观察组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古霉素A(TSA)对体外培养膀胱癌细胞生长情况及相关基因表达的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:MTT法检测不同浓度(0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 μmol/L)的TSA对人膀胱癌T24细胞生长的影响.透射电镜观察TSA(0.4 μmol/L) 诱导后膀胱癌细胞的形态学变化;流式细胞术检测处理后膀胱癌细胞周期分布及凋亡率的变化;Western 印迹法检测处理后膀胱癌细胞组蛋白乙酰化水平的变化;FQ-PCR检测处理后膀胱癌细胞p21CIP1/WAF1、cyclin A和cyclin E mRNA的表达.结果:TSA体外能明显抑制T24细胞生长,且抑制作用呈明显的剂量、时间依赖性.TSA(0.4 μmol/L)诱导后,透射电镜下可见大量具有凋亡形态特征的T24细胞;流式细胞术检测示细胞阻滞于G0/G1期,并且出现典型的亚二倍体(Sub-G1)峰;TSA可明显提高组蛋白乙酰化水平,并诱导p21CIP1/WAF1的mRNA表达和抑制cyclin A的mRNA表达,而对cyclin E无明显作用.结论:TSA可通过诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞而发挥体外抗膀胱癌作用,其作用机制可能涉及组蛋白乙酰化水平以及相关基因(p21CIP1/WAF1、cyclin A)表达的调控.
목적:관찰조단백거을선화매(HDAC)억제제곡고매소A(TSA)대체외배양방광암세포생장정황급상관기인표체적영향,병탐토기가능적작용궤제.방법:MTT법검측불동농도(0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 μmol/L)적TSA대인방광암T24세포생장적영향.투사전경관찰TSA(0.4 μmol/L) 유도후방광암세포적형태학변화;류식세포술검측처리후방광암세포주기분포급조망솔적변화;Western 인적법검측처리후방광암세포조단백을선화수평적변화;FQ-PCR검측처리후방광암세포p21CIP1/WAF1、cyclin A화cyclin E mRNA적표체.결과:TSA체외능명현억제T24세포생장,차억제작용정명현적제량、시간의뢰성.TSA(0.4 μmol/L)유도후,투사전경하가견대량구유조망형태특정적T24세포;류식세포술검측시세포조체우G0/G1기,병차출현전형적아이배체(Sub-G1)봉;TSA가명현제고조단백을선화수평,병유도p21CIP1/WAF1적mRNA표체화억제cyclin A적mRNA표체,이대cyclin E무명현작용.결론:TSA가통과유도세포조망급세포주기조체이발휘체외항방광암작용,기작용궤제가능섭급조단백을선화수평이급상관기인(p21CIP1/WAF1、cyclin A)표체적조공.