复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2007年
3期
323-328
,共6页
吴洁%桑瑛颖%陶静%王英明%吴超群%邓可京%乔守怡
吳潔%桑瑛穎%陶靜%王英明%吳超群%鄧可京%喬守怡
오길%상영영%도정%왕영명%오초군%산가경%교수이
P27蛋白%细胞周期%肝细胞癌细胞株
P27蛋白%細胞週期%肝細胞癌細胞株
P27단백%세포주기%간세포암세포주
目的 探讨肿瘤抑制基因p27kip1编码的P27蛋白过表达与HCC细胞株细胞周期的关系.方法 本研究从野生型p27kip1基因真核表达质粒pEYFP-P27(WT)出发,采用定点诱变技术构建了突变型p27kip1基因表达载体pEYFP-P27(S10A)、pEYFP-P27(T157A)和pEYFP-P27(T187A),然后用脂质体法将上述质粒转染HCC细胞株HepG2和Hep3B,Western Blotting检测内源和转入的P27蛋白表达,流式细胞仪检测P27蛋白过表达对HCC细胞株细胞周期的影响.结果 野生型和3种突变型的P27融合蛋白在HepG2和Hep3B中的过表达都能增强G0/G1期阻抑;同时,对HepG2细胞,核定位位点突变体P27(T157A)比野生型P27蛋白及其他两个突变体具有更强的细胞周期阻抑活性,而对Hep3B细胞,3个突变体和野生型p27蛋白对细胞周期的影响无明显差异.结论 P27蛋白过表达能够显著增强HCC细胞株的G0/G1期阻抑.
目的 探討腫瘤抑製基因p27kip1編碼的P27蛋白過錶達與HCC細胞株細胞週期的關繫.方法 本研究從野生型p27kip1基因真覈錶達質粒pEYFP-P27(WT)齣髮,採用定點誘變技術構建瞭突變型p27kip1基因錶達載體pEYFP-P27(S10A)、pEYFP-P27(T157A)和pEYFP-P27(T187A),然後用脂質體法將上述質粒轉染HCC細胞株HepG2和Hep3B,Western Blotting檢測內源和轉入的P27蛋白錶達,流式細胞儀檢測P27蛋白過錶達對HCC細胞株細胞週期的影響.結果 野生型和3種突變型的P27融閤蛋白在HepG2和Hep3B中的過錶達都能增彊G0/G1期阻抑;同時,對HepG2細胞,覈定位位點突變體P27(T157A)比野生型P27蛋白及其他兩箇突變體具有更彊的細胞週期阻抑活性,而對Hep3B細胞,3箇突變體和野生型p27蛋白對細胞週期的影響無明顯差異.結論 P27蛋白過錶達能夠顯著增彊HCC細胞株的G0/G1期阻抑.
목적 탐토종류억제기인p27kip1편마적P27단백과표체여HCC세포주세포주기적관계.방법 본연구종야생형p27kip1기인진핵표체질립pEYFP-P27(WT)출발,채용정점유변기술구건료돌변형p27kip1기인표체재체pEYFP-P27(S10A)、pEYFP-P27(T157A)화pEYFP-P27(T187A),연후용지질체법장상술질립전염HCC세포주HepG2화Hep3B,Western Blotting검측내원화전입적P27단백표체,류식세포의검측P27단백과표체대HCC세포주세포주기적영향.결과 야생형화3충돌변형적P27융합단백재HepG2화Hep3B중적과표체도능증강G0/G1기조억;동시,대HepG2세포,핵정위위점돌변체P27(T157A)비야생형P27단백급기타량개돌변체구유경강적세포주기조억활성,이대Hep3B세포,3개돌변체화야생형p27단백대세포주기적영향무명현차이.결론 P27단백과표체능구현저증강HCC세포주적G0/G1기조억.
