医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2007年
5期
37-40
,共4页
张福军%季平%李庆姝%张劲松
張福軍%季平%李慶姝%張勁鬆
장복군%계평%리경주%장경송
重组干扰质粒%脂质体转染%基因表达%实时荧光定量%RT-PCR
重組榦擾質粒%脂質體轉染%基因錶達%實時熒光定量%RT-PCR
중조간우질립%지질체전염%기인표체%실시형광정량%RT-PCR
目的 探讨重组干扰质粒对口腔腺样囊性癌多药抗性细胞株(Acc-3/CDDP)细胞中Bcl-2基因表达的干扰效率.方法 按siRNA设计原则设计针对Bcl-2基因的Oligo DNA,体外化学合成Oligo DNA,Oligo DNA退火、连接、转化、筛选克隆,构建针对Bcl-2基因的表达重组RNA干扰质粒(psiB1、psiB2、psiB3),细胞脂质体转染多药抗性Acc-3/CDDP细胞,Realtime RT-PCR的标准曲线、扩增曲线和熔解曲线的数据收集处理,采用荧光定量RT-PCR方法检测重组干扰质粒对多药抗性Acc-3/CDDP细胞中Bcl-2基因表达的干扰效率.结果 实时荧光定量RT-PCR方法检测psiB1、psiB2、psiB3质粒脂质体转染后Bcl-2基因的表达情况结果显示:psiB1、psiB3相对于对照组无明显干扰效果,psiB2的干扰程度达66.20%.结论 针对Bcl-2基因的表达重组RNA干扰质粒psiB2(CCgggAgATAgTgATgAA)能有效沉默多药抗性Acc-3/CDDP细胞中Bcl-2基因的表达.
目的 探討重組榦擾質粒對口腔腺樣囊性癌多藥抗性細胞株(Acc-3/CDDP)細胞中Bcl-2基因錶達的榦擾效率.方法 按siRNA設計原則設計針對Bcl-2基因的Oligo DNA,體外化學閤成Oligo DNA,Oligo DNA退火、連接、轉化、篩選剋隆,構建針對Bcl-2基因的錶達重組RNA榦擾質粒(psiB1、psiB2、psiB3),細胞脂質體轉染多藥抗性Acc-3/CDDP細胞,Realtime RT-PCR的標準麯線、擴增麯線和鎔解麯線的數據收集處理,採用熒光定量RT-PCR方法檢測重組榦擾質粒對多藥抗性Acc-3/CDDP細胞中Bcl-2基因錶達的榦擾效率.結果 實時熒光定量RT-PCR方法檢測psiB1、psiB2、psiB3質粒脂質體轉染後Bcl-2基因的錶達情況結果顯示:psiB1、psiB3相對于對照組無明顯榦擾效果,psiB2的榦擾程度達66.20%.結論 針對Bcl-2基因的錶達重組RNA榦擾質粒psiB2(CCgggAgATAgTgATgAA)能有效沉默多藥抗性Acc-3/CDDP細胞中Bcl-2基因的錶達.
목적 탐토중조간우질립대구강선양낭성암다약항성세포주(Acc-3/CDDP)세포중Bcl-2기인표체적간우효솔.방법 안siRNA설계원칙설계침대Bcl-2기인적Oligo DNA,체외화학합성Oligo DNA,Oligo DNA퇴화、련접、전화、사선극륭,구건침대Bcl-2기인적표체중조RNA간우질립(psiB1、psiB2、psiB3),세포지질체전염다약항성Acc-3/CDDP세포,Realtime RT-PCR적표준곡선、확증곡선화용해곡선적수거수집처리,채용형광정량RT-PCR방법검측중조간우질립대다약항성Acc-3/CDDP세포중Bcl-2기인표체적간우효솔.결과 실시형광정량RT-PCR방법검측psiB1、psiB2、psiB3질립지질체전염후Bcl-2기인적표체정황결과현시:psiB1、psiB3상대우대조조무명현간우효과,psiB2적간우정도체66.20%.결론 침대Bcl-2기인적표체중조RNA간우질립psiB2(CCgggAgATAgTgATgAA)능유효침묵다약항성Acc-3/CDDP세포중Bcl-2기인적표체.
