中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2008年
8期
1435-1439
,共5页
刁利红%于海波%皮敏%罗文舒%饶晓丹%刘远声%杨卓欣
刁利紅%于海波%皮敏%囉文舒%饒曉丹%劉遠聲%楊卓訢
조리홍%우해파%피민%라문서%요효단%류원성%양탁흔
神经干细胞%电针%任脉%碱性成纤维细胞生长因子%5-溴-2'-脱氧尿苷,5-溴-2'-脱氧尿苷/巢蛋白%脑缺血%增殖%大鼠
神經榦細胞%電針%任脈%堿性成纖維細胞生長因子%5-溴-2'-脫氧尿苷,5-溴-2'-脫氧尿苷/巢蛋白%腦缺血%增殖%大鼠
신경간세포%전침%임맥%감성성섬유세포생장인자%5-추-2'-탈양뇨감,5-추-2'-탈양뇨감/소단백%뇌결혈%증식%대서
目的:近来的研究认为,针刺任脉治疗脑卒中的机制在于针刺任脉可能产生与干细胞增殖分化有一些联系的生长因子.脑缺血损伤后调动内源性神经干细胞试图自我修复的途径应是多元化的,针刺及外源性生成因子的给予为其不同的途径.实验拟观察电针任脉和肌肉注射碱性成纤维细胞生长因子对脑缺血模型大鼠缺血侧脑室下区5-溴-2'-脱氧尿苷和5-溴-2'-脱氧尿苷/巢蛋白阳性细胞的表达的影响.方法:实验于2004-09/2005-07在中山大学医学院解剖学实验室完成.①材料:选用成年健康雄性Wistar大鼠83只.将实验动物按随机抽签法分为5组:空白对照组6只、假手术组6只、模型组26只、电针任脉组23只、碱性成纤维细胞生长因子组22只.后3组又分为缺血后7,14和28 d 3个时间点进行观察.②干预:除空白对照组和假手术组外,其余大鼠采用线栓法制作局灶性脑缺血模型.再灌注后参考Longa神经病学评分标准,1～4分为造模成功.空白对照组不作任何处理;假手术组仅分离右侧颈总动脉并离断右颈外动脉,不予栓塞.电针任脉组大鼠于造模后第2天采用上海华谊医用仪器厂生产的G6805Ⅱ型电针仪针刺承浆、气海、关元3穴,针刺后加电,疏密波刺激(疏波30 Hz,密波100 Hz),强度6～15 V,以身体相应部位出现轻微颤动为准,持续时间为20 min.碱性成纤维细胞生长因子组:再灌后立即给药,肌注碱性成纤维细胞生长因子4 000 U/d,此后每天肌注碱性成纤维细胞生长因子,1次/d.模型组、假手术组大鼠于造模后第2天固定于针刺操作台上20 min,不予针刺.空白对照组大鼠不作任何处理.③观察指标:通过免疫荧光方法测定侧脑室下区5-溴-2'-脱氧尿苷和5-溴-2'-脱氧尿苷/巢蛋白阳性细胞的表达.用Olympus FV 500激光共聚焦显微镜系统,在200倍镜下,计数平均5个视野阳性细胞数.结果:造模成功大鼠54只及空白对照组和模型组各6只进入结果分析.侧脑室5-溴-2'-脱氧尿苷阳性细胞数和5-溴-2'-脱氧尿苷/巢蛋白双标细胞:空白对照组与假手术组比较,差异无显著性意义(P > 0.05).模型组与空白对照组相比,均有不同程度的增加,其中造模后7和14 d差异有显著性意义(P < 0.01).电针任脉组和碱性成纤维细胞生长因子组造模后3个时间点与模型组比较,均有较大程度的增加,差异有显著性意义(P < 0.05～0.01).碱性成纤维细胞生长因子组与电针任脉组相比,差异无显著性意义(P > 0.05).结论:电针任脉和肌肉注射碱性成纤维细胞生长因子均可促进局灶性缺血模型大鼠原位神经干细胞增殖,且两者作用相当.
目的:近來的研究認為,針刺任脈治療腦卒中的機製在于針刺任脈可能產生與榦細胞增殖分化有一些聯繫的生長因子.腦缺血損傷後調動內源性神經榦細胞試圖自我脩複的途徑應是多元化的,針刺及外源性生成因子的給予為其不同的途徑.實驗擬觀察電針任脈和肌肉註射堿性成纖維細胞生長因子對腦缺血模型大鼠缺血側腦室下區5-溴-2'-脫氧尿苷和5-溴-2'-脫氧尿苷/巢蛋白暘性細胞的錶達的影響.方法:實驗于2004-09/2005-07在中山大學醫學院解剖學實驗室完成.①材料:選用成年健康雄性Wistar大鼠83隻.將實驗動物按隨機抽籤法分為5組:空白對照組6隻、假手術組6隻、模型組26隻、電針任脈組23隻、堿性成纖維細胞生長因子組22隻.後3組又分為缺血後7,14和28 d 3箇時間點進行觀察.②榦預:除空白對照組和假手術組外,其餘大鼠採用線栓法製作跼竈性腦缺血模型.再灌註後參攷Longa神經病學評分標準,1～4分為造模成功.空白對照組不作任何處理;假手術組僅分離右側頸總動脈併離斷右頸外動脈,不予栓塞.電針任脈組大鼠于造模後第2天採用上海華誼醫用儀器廠生產的G6805Ⅱ型電針儀針刺承漿、氣海、關元3穴,針刺後加電,疏密波刺激(疏波30 Hz,密波100 Hz),彊度6～15 V,以身體相應部位齣現輕微顫動為準,持續時間為20 min.堿性成纖維細胞生長因子組:再灌後立即給藥,肌註堿性成纖維細胞生長因子4 000 U/d,此後每天肌註堿性成纖維細胞生長因子,1次/d.模型組、假手術組大鼠于造模後第2天固定于針刺操作檯上20 min,不予針刺.空白對照組大鼠不作任何處理.③觀察指標:通過免疫熒光方法測定側腦室下區5-溴-2'-脫氧尿苷和5-溴-2'-脫氧尿苷/巢蛋白暘性細胞的錶達.用Olympus FV 500激光共聚焦顯微鏡繫統,在200倍鏡下,計數平均5箇視野暘性細胞數.結果:造模成功大鼠54隻及空白對照組和模型組各6隻進入結果分析.側腦室5-溴-2'-脫氧尿苷暘性細胞數和5-溴-2'-脫氧尿苷/巢蛋白雙標細胞:空白對照組與假手術組比較,差異無顯著性意義(P > 0.05).模型組與空白對照組相比,均有不同程度的增加,其中造模後7和14 d差異有顯著性意義(P < 0.01).電針任脈組和堿性成纖維細胞生長因子組造模後3箇時間點與模型組比較,均有較大程度的增加,差異有顯著性意義(P < 0.05～0.01).堿性成纖維細胞生長因子組與電針任脈組相比,差異無顯著性意義(P > 0.05).結論:電針任脈和肌肉註射堿性成纖維細胞生長因子均可促進跼竈性缺血模型大鼠原位神經榦細胞增殖,且兩者作用相噹.
목적:근래적연구인위,침자임맥치료뇌졸중적궤제재우침자임맥가능산생여간세포증식분화유일사련계적생장인자.뇌결혈손상후조동내원성신경간세포시도자아수복적도경응시다원화적,침자급외원성생성인자적급여위기불동적도경.실험의관찰전침임맥화기육주사감성성섬유세포생장인자대뇌결혈모형대서결혈측뇌실하구5-추-2'-탈양뇨감화5-추-2'-탈양뇨감/소단백양성세포적표체적영향.방법:실험우2004-09/2005-07재중산대학의학원해부학실험실완성.①재료:선용성년건강웅성Wistar대서83지.장실험동물안수궤추첨법분위5조:공백대조조6지、가수술조6지、모형조26지、전침임맥조23지、감성성섬유세포생장인자조22지.후3조우분위결혈후7,14화28 d 3개시간점진행관찰.②간예:제공백대조조화가수술조외,기여대서채용선전법제작국조성뇌결혈모형.재관주후삼고Longa신경병학평분표준,1～4분위조모성공.공백대조조불작임하처리;가수술조부분리우측경총동맥병리단우경외동맥,불여전새.전침임맥조대서우조모후제2천채용상해화의의용의기엄생산적G6805Ⅱ형전침의침자승장、기해、관원3혈,침자후가전,소밀파자격(소파30 Hz,밀파100 Hz),강도6～15 V,이신체상응부위출현경미전동위준,지속시간위20 min.감성성섬유세포생장인자조:재관후립즉급약,기주감성성섬유세포생장인자4 000 U/d,차후매천기주감성성섬유세포생장인자,1차/d.모형조、가수술조대서우조모후제2천고정우침자조작태상20 min,불여침자.공백대조조대서불작임하처리.③관찰지표:통과면역형광방법측정측뇌실하구5-추-2'-탈양뇨감화5-추-2'-탈양뇨감/소단백양성세포적표체.용Olympus FV 500격광공취초현미경계통,재200배경하,계수평균5개시야양성세포수.결과:조모성공대서54지급공백대조조화모형조각6지진입결과분석.측뇌실5-추-2'-탈양뇨감양성세포수화5-추-2'-탈양뇨감/소단백쌍표세포:공백대조조여가수술조비교,차이무현저성의의(P > 0.05).모형조여공백대조조상비,균유불동정도적증가,기중조모후7화14 d차이유현저성의의(P < 0.01).전침임맥조화감성성섬유세포생장인자조조모후3개시간점여모형조비교,균유교대정도적증가,차이유현저성의의(P < 0.05～0.01).감성성섬유세포생장인자조여전침임맥조상비,차이무현저성의의(P > 0.05).결론:전침임맥화기육주사감성성섬유세포생장인자균가촉진국조성결혈모형대서원위신경간세포증식,차량자작용상당.
