中国肿瘤
中國腫瘤
중국종류
BULLETIN OF CHINESE CANCER
2008年
2期
137-141
,共5页
张宇雯%刘兴汉%马洪星%曲天舒%李冀红%栗亚
張宇雯%劉興漢%馬洪星%麯天舒%李冀紅%慄亞
장우문%류흥한%마홍성%곡천서%리기홍%률아
puma基因%凋亡%胃肿瘤%线粒体
puma基因%凋亡%胃腫瘤%線粒體
puma기인%조망%위종류%선립체
[目的]探讨puma基因转染对人胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制.[方法]应用脂质体介导重组真核表达载体pEGFP-C1-PUMA瞬时转染至SGC-7901细胞.分别用荧光显微镜和RT-PCR法检测外源基因的表达.MTT比色法测定细胞增殖的抑制.Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期和线粒体膜电位的变化,Western blot检测细胞色素C(Cyt C)和凋亡诱导因子(AIF)的转位.[结果]外源性puma基因在pEGFP-C1-PUMA转染的SGC-7901细胞中实现了表达.PUMA表达使SGC-7901细胞的增殖能力降低并诱导凋亡,转染24、48、72h的生长抑制率分别为19.3%、34.7%、42.2%,凋亡率分别为19.6%、35.4%、46.6%.PUMA表达的SGC-7901细胞DNA合成受到抑制,周期阻滞在G0/G1期;线粒体膜电位明显下降,Cyt C、AIF从线粒体进入胞浆.[结论]puma基因转染可有效抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,促进其凋亡.促凋亡机制主要是线粒体途径,与线粒体膜电位降低和Cyt C、AIF从线粒体释放有关.
[目的]探討puma基因轉染對人胃癌SGC-7901細胞株增殖和凋亡的影響及其作用機製.[方法]應用脂質體介導重組真覈錶達載體pEGFP-C1-PUMA瞬時轉染至SGC-7901細胞.分彆用熒光顯微鏡和RT-PCR法檢測外源基因的錶達.MTT比色法測定細胞增殖的抑製.Hoechst 33342染色法檢測細胞凋亡,流式細胞儀檢測細胞週期和線粒體膜電位的變化,Western blot檢測細胞色素C(Cyt C)和凋亡誘導因子(AIF)的轉位.[結果]外源性puma基因在pEGFP-C1-PUMA轉染的SGC-7901細胞中實現瞭錶達.PUMA錶達使SGC-7901細胞的增殖能力降低併誘導凋亡,轉染24、48、72h的生長抑製率分彆為19.3%、34.7%、42.2%,凋亡率分彆為19.6%、35.4%、46.6%.PUMA錶達的SGC-7901細胞DNA閤成受到抑製,週期阻滯在G0/G1期;線粒體膜電位明顯下降,Cyt C、AIF從線粒體進入胞漿.[結論]puma基因轉染可有效抑製胃癌SGC-7901細胞的增殖,促進其凋亡.促凋亡機製主要是線粒體途徑,與線粒體膜電位降低和Cyt C、AIF從線粒體釋放有關.
[목적]탐토puma기인전염대인위암SGC-7901세포주증식화조망적영향급기작용궤제.[방법]응용지질체개도중조진핵표체재체pEGFP-C1-PUMA순시전염지SGC-7901세포.분별용형광현미경화RT-PCR법검측외원기인적표체.MTT비색법측정세포증식적억제.Hoechst 33342염색법검측세포조망,류식세포의검측세포주기화선립체막전위적변화,Western blot검측세포색소C(Cyt C)화조망유도인자(AIF)적전위.[결과]외원성puma기인재pEGFP-C1-PUMA전염적SGC-7901세포중실현료표체.PUMA표체사SGC-7901세포적증식능력강저병유도조망,전염24、48、72h적생장억제솔분별위19.3%、34.7%、42.2%,조망솔분별위19.6%、35.4%、46.6%.PUMA표체적SGC-7901세포DNA합성수도억제,주기조체재G0/G1기;선립체막전위명현하강,Cyt C、AIF종선립체진입포장.[결론]puma기인전염가유효억제위암SGC-7901세포적증식,촉진기조망.촉조망궤제주요시선립체도경,여선립체막전위강저화Cyt C、AIF종선립체석방유관.