中华乳腺病杂志（电子版）
中華乳腺病雜誌（電子版）
중화유선병잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF BREAST DISEASE(ELECTRONIC VERSION)
2008年
1期
70-80
,共11页
孙玉兰%王亚红%张媛媛%许少峰%付丽
孫玉蘭%王亞紅%張媛媛%許少峰%付麗
손옥란%왕아홍%장원원%허소봉%부려
乳腺肿瘤%个体性反义RNA%p53基因%基因治疗
乳腺腫瘤%箇體性反義RNA%p53基因%基因治療
유선종류%개체성반의RNA%p53기인%기인치료
目的 研究p53基因的个体性反义RNA联合野生型p53(wt-p53)对乳腺癌细胞的增殖抑制作用,探讨体外双重基因治疗的意义.方法 将wt-p53重组质粒pC53-SN3转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,G418筛选稳定表达wt-p53的细胞克隆(WTp53-231细胞);体外构建针对MDAMB-231细胞p53基因突变外显子8(exon8)的反义表达载体[pGEM3zf(+/-)p53exon8],并制备其反义RNA(ASp53exon8'RNA);以MDA-MB-231细胞为对照,阳离子脂质体介导下ASp53exon8'RNA转染WTp53-231细胞;转染48h后,用MTT法检测细胞生长活性,TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫细胞化学LSAB染色法检测p53蛋白的表达.结果 ASp53exon8RNA 转染 WTp53-231 细胞与ASp53exon8'RNA转染MDA-MB-231细胞比较,前者可进一步抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡.结论 p53基因的个体性反义RNA联合wt-p53共转染可协同抑制乳腺癌细胞增殖,达到"反义拯救"基因治疗目的 .
目的 研究p53基因的箇體性反義RNA聯閤野生型p53(wt-p53)對乳腺癌細胞的增殖抑製作用,探討體外雙重基因治療的意義.方法 將wt-p53重組質粒pC53-SN3轉染人乳腺癌MDA-MB-231細胞,G418篩選穩定錶達wt-p53的細胞剋隆(WTp53-231細胞);體外構建針對MDAMB-231細胞p53基因突變外顯子8(exon8)的反義錶達載體[pGEM3zf(+/-)p53exon8],併製備其反義RNA(ASp53exon8'RNA);以MDA-MB-231細胞為對照,暘離子脂質體介導下ASp53exon8'RNA轉染WTp53-231細胞;轉染48h後,用MTT法檢測細胞生長活性,TUNEL法檢測細胞凋亡情況,免疫細胞化學LSAB染色法檢測p53蛋白的錶達.結果 ASp53exon8RNA 轉染 WTp53-231 細胞與ASp53exon8'RNA轉染MDA-MB-231細胞比較,前者可進一步抑製腫瘤細胞增殖和誘導凋亡.結論 p53基因的箇體性反義RNA聯閤wt-p53共轉染可協同抑製乳腺癌細胞增殖,達到"反義拯救"基因治療目的 .
목적 연구p53기인적개체성반의RNA연합야생형p53(wt-p53)대유선암세포적증식억제작용,탐토체외쌍중기인치료적의의.방법 장wt-p53중조질립pC53-SN3전염인유선암MDA-MB-231세포,G418사선은정표체wt-p53적세포극륭(WTp53-231세포);체외구건침대MDAMB-231세포p53기인돌변외현자8(exon8)적반의표체재체[pGEM3zf(+/-)p53exon8],병제비기반의RNA(ASp53exon8'RNA);이MDA-MB-231세포위대조,양리자지질체개도하ASp53exon8'RNA전염WTp53-231세포;전염48h후,용MTT법검측세포생장활성,TUNEL법검측세포조망정황,면역세포화학LSAB염색법검측p53단백적표체.결과 ASp53exon8RNA 전염 WTp53-231 세포여ASp53exon8'RNA전염MDA-MB-231세포비교,전자가진일보억제종류세포증식화유도조망.결론 p53기인적개체성반의RNA연합wt-p53공전염가협동억제유선암세포증식,체도"반의증구"기인치료목적 .
