畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2010年
4期
58-61
,共4页
邬成业%史平玲%张改平%郝慧芳%王爱萍%祁艳华%卜丹
鄔成業%史平玲%張改平%郝慧芳%王愛萍%祁豔華%蔔丹
오성업%사평령%장개평%학혜방%왕애평%기염화%복단
禽流感%核衣壳蛋白%原核表达
禽流感%覈衣殼蛋白%原覈錶達
금류감%핵의각단백%원핵표체
为了提高禽流感核衣壳蛋白(NP)在大肠杆菌中的表达量,试验研究了载体、培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对NP融合蛋白表达量的影响.结果:使用LB培养基于37℃培养3.5 h后,采用终浓度为2mmol/L的IPTG在28℃、200 r/min诱导培养5 h,pET32a-NP融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-NP融合蛋白的分子质量与预计大小一致,约为70 ku;Western-blot结果表明,pET32a-NP融合蛋白能与抗His标签的单克隆抗体发生特异性反应,说明NP蛋白得到正确表达.
為瞭提高禽流感覈衣殼蛋白(NP)在大腸桿菌中的錶達量,試驗研究瞭載體、培養基、溫度、轉速、誘導時間以及誘導劑IPTG濃度等不同條件對NP融閤蛋白錶達量的影響.結果:使用LB培養基于37℃培養3.5 h後,採用終濃度為2mmol/L的IPTG在28℃、200 r/min誘導培養5 h,pET32a-NP融閤蛋白錶達量最大;SDS-PAGE檢測結果錶明pET32a-NP融閤蛋白的分子質量與預計大小一緻,約為70 ku;Western-blot結果錶明,pET32a-NP融閤蛋白能與抗His標籤的單剋隆抗體髮生特異性反應,說明NP蛋白得到正確錶達.
위료제고금류감핵의각단백(NP)재대장간균중적표체량,시험연구료재체、배양기、온도、전속、유도시간이급유도제IPTG농도등불동조건대NP융합단백표체량적영향.결과:사용LB배양기우37℃배양3.5 h후,채용종농도위2mmol/L적IPTG재28℃、200 r/min유도배양5 h,pET32a-NP융합단백표체량최대;SDS-PAGE검측결과표명pET32a-NP융합단백적분자질량여예계대소일치,약위70 ku;Western-blot결과표명,pET32a-NP융합단백능여항His표첨적단극륭항체발생특이성반응,설명NP단백득도정학표체.
