山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2010年
34期
4-6
,共3页
胰腺癌%人端粒酶反转录酶%启动子%铜绿假单胞菌外毒素%绿色荧光蛋白%基因疗法
胰腺癌%人耑粒酶反轉錄酶%啟動子%銅綠假單胞菌外毒素%綠色熒光蛋白%基因療法
이선암%인단립매반전록매%계동자%동록가단포균외독소%록색형광단백%기인요법
目的 构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并观察其对人胰腺癌MiaPaCa2细胞凋亡的影响.方法 采用PCR法构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并用双酶切法鉴定;将MiaPaCa2细胞分为5组,A组为空白对照组,仅加入含10% FBS的DMEM;B、C、D、E组分别转染pIRES2-EGFP、phTERT-IRES2-EGFP、pPE38KDEL-IRES2-EGFP、phTERTp-PE38KEDL-IRES2-EGFP,采用TUNEL法检测MiaPaCa2细胞的凋亡指数.结果 重组质粒的PCR产物及酶切后片段的测序结果与GeneBank报道序列一致.A组转染24、48 h时MiaPaCa2细胞凋亡率分别为17.12%±1.66%、24.86%±2.80%,B组分别为18.14%±1.61%、26.47%±2.71%,C组为19.08%±3.84%、27.42%±7.26%,D组为29.46%±2.86%、38.12%±3.19%,E组为72.16%±4.79%、86.40%±7.71%.B～E组与A组比较,P均<0.05;E组与D组比较,P<0.05.结论 成功构建了含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,该质粒可促进人胰腺癌MiaPaCa2细胞的凋亡.
目的 構建含hTERT啟動子和PE38KDEL片段的重組錶達質粒,併觀察其對人胰腺癌MiaPaCa2細胞凋亡的影響.方法 採用PCR法構建含hTERT啟動子和PE38KDEL片段的重組錶達質粒,併用雙酶切法鑒定;將MiaPaCa2細胞分為5組,A組為空白對照組,僅加入含10% FBS的DMEM;B、C、D、E組分彆轉染pIRES2-EGFP、phTERT-IRES2-EGFP、pPE38KDEL-IRES2-EGFP、phTERTp-PE38KEDL-IRES2-EGFP,採用TUNEL法檢測MiaPaCa2細胞的凋亡指數.結果 重組質粒的PCR產物及酶切後片段的測序結果與GeneBank報道序列一緻.A組轉染24、48 h時MiaPaCa2細胞凋亡率分彆為17.12%±1.66%、24.86%±2.80%,B組分彆為18.14%±1.61%、26.47%±2.71%,C組為19.08%±3.84%、27.42%±7.26%,D組為29.46%±2.86%、38.12%±3.19%,E組為72.16%±4.79%、86.40%±7.71%.B～E組與A組比較,P均<0.05;E組與D組比較,P<0.05.結論 成功構建瞭含hTERT啟動子和PE38KDEL片段的重組錶達質粒,該質粒可促進人胰腺癌MiaPaCa2細胞的凋亡.
목적 구건함hTERT계동자화PE38KDEL편단적중조표체질립,병관찰기대인이선암MiaPaCa2세포조망적영향.방법 채용PCR법구건함hTERT계동자화PE38KDEL편단적중조표체질립,병용쌍매절법감정;장MiaPaCa2세포분위5조,A조위공백대조조,부가입함10% FBS적DMEM;B、C、D、E조분별전염pIRES2-EGFP、phTERT-IRES2-EGFP、pPE38KDEL-IRES2-EGFP、phTERTp-PE38KEDL-IRES2-EGFP,채용TUNEL법검측MiaPaCa2세포적조망지수.결과 중조질립적PCR산물급매절후편단적측서결과여GeneBank보도서렬일치.A조전염24、48 h시MiaPaCa2세포조망솔분별위17.12%±1.66%、24.86%±2.80%,B조분별위18.14%±1.61%、26.47%±2.71%,C조위19.08%±3.84%、27.42%±7.26%,D조위29.46%±2.86%、38.12%±3.19%,E조위72.16%±4.79%、86.40%±7.71%.B～E조여A조비교,P균<0.05;E조여D조비교,P<0.05.결론 성공구건료함hTERT계동자화PE38KDEL편단적중조표체질립,해질립가촉진인이선암MiaPaCa2세포적조망.
