化学与生物工程
化學與生物工程
화학여생물공정
CHEMISTRY & BIOENGINEERING
2011年
7期
44-48
,共5页
赵检%王旭颖%王茂淋%郑世学%喻子牛%张吉斌
趙檢%王旭穎%王茂淋%鄭世學%喻子牛%張吉斌
조검%왕욱영%왕무림%정세학%유자우%장길빈
粘红酵母%ATP:柠檬酸裂解酶%克隆%表达%酶比活%酶特性
粘紅酵母%ATP:檸檬痠裂解酶%剋隆%錶達%酶比活%酶特性
점홍효모%ATP:저몽산렬해매%극륭%표체%매비활%매특성
从粘红酵母(Rhodotorula glutinis)中克隆得到ATP:柠檬酸裂解酶基因两个亚基acl1和acl2,转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115进行诱导表达,通过Ni柱纯化目的蛋白,以实时波长扫描对重组蛋白的酶学性质进行测定.SDS-PAGE分析表明,两个亚基ACL1和ACL2的分子量分别为66 kDa和55 kDa.重组蛋白的酶学测定表明,经毕赤酵母表达后,单个亚基酶活性不到1.0 U·mg-1,双亚基混合后具有较高的酶活性,当混合质量比为1∶1时全酶的酶比活力达到最大,为6.5 U· mg-1,酶反应的最佳条件为:pH值8.5、37℃反应10 min.为提高油料作物油脂含量提供了新的转基因材料.
從粘紅酵母(Rhodotorula glutinis)中剋隆得到ATP:檸檬痠裂解酶基因兩箇亞基acl1和acl2,轉化畢赤酵母(Pichia pastoris)GS115進行誘導錶達,通過Ni柱純化目的蛋白,以實時波長掃描對重組蛋白的酶學性質進行測定.SDS-PAGE分析錶明,兩箇亞基ACL1和ACL2的分子量分彆為66 kDa和55 kDa.重組蛋白的酶學測定錶明,經畢赤酵母錶達後,單箇亞基酶活性不到1.0 U·mg-1,雙亞基混閤後具有較高的酶活性,噹混閤質量比為1∶1時全酶的酶比活力達到最大,為6.5 U· mg-1,酶反應的最佳條件為:pH值8.5、37℃反應10 min.為提高油料作物油脂含量提供瞭新的轉基因材料.
종점홍효모(Rhodotorula glutinis)중극륭득도ATP:저몽산렬해매기인량개아기acl1화acl2,전화필적효모(Pichia pastoris)GS115진행유도표체,통과Ni주순화목적단백,이실시파장소묘대중조단백적매학성질진행측정.SDS-PAGE분석표명,량개아기ACL1화ACL2적분자량분별위66 kDa화55 kDa.중조단백적매학측정표명,경필적효모표체후,단개아기매활성불도1.0 U·mg-1,쌍아기혼합후구유교고적매활성,당혼합질량비위1∶1시전매적매비활력체도최대,위6.5 U· mg-1,매반응적최가조건위:pH치8.5、37℃반응10 min.위제고유료작물유지함량제공료신적전기인재료.
