生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
10期
114-119
,共6页
祁伟彦%孙鹤%周妮%朱莉%郎志宏%黄大昉
祁偉彥%孫鶴%週妮%硃莉%郎誌宏%黃大昉
기위언%손학%주니%주리%랑지굉%황대방
cry1Ah%mG2-epsps%2A%LP4%转基因烟草
cry1Ah%mG2-epsps%2A%LP4%轉基因煙草
cry1Ah%mG2-epsps%2A%LP4%전기인연초
随着植物基因工程的发展,将多个基因转化植株已成为研究的热点之一,利用连接肽进行多个基因融合的策略巳引起广泛关注.利用连接多肽2A和LP4/2A分别将抗虫基因Bt(Bacillus thuringiensis,Bt) cry1Ah和耐革甘膦基因mG2epsps连接起来,构建了4个融合基因表达载体pHAG、pHLAG、pGAH、pGLAH和两个单基因载体pSAh、pSmG2,其中pHAG、pHLAG是Bt cry1Ah基因在前,mG2-epsps基因在后,pGAH、pGLAH是mG2-epsps基因在前,Bt cry1Ah基因在后,分别用2A和LP4/2A作为连接肽,由CaMV35S启动子驱动.利用农杆菌介导法将6个植物表达载体转入烟草,得到再生植株529株.经PCR检测,有261株再生苗为阳性植株,转化率达到49.3％.获得的转基因烟草可用于分析连接肽2A和LP4/2A的剪切效率以及不同基因与连接肽连接位置差异对基因表达的影响.
隨著植物基因工程的髮展,將多箇基因轉化植株已成為研究的熱點之一,利用連接肽進行多箇基因融閤的策略巳引起廣汎關註.利用連接多肽2A和LP4/2A分彆將抗蟲基因Bt(Bacillus thuringiensis,Bt) cry1Ah和耐革甘膦基因mG2epsps連接起來,構建瞭4箇融閤基因錶達載體pHAG、pHLAG、pGAH、pGLAH和兩箇單基因載體pSAh、pSmG2,其中pHAG、pHLAG是Bt cry1Ah基因在前,mG2-epsps基因在後,pGAH、pGLAH是mG2-epsps基因在前,Bt cry1Ah基因在後,分彆用2A和LP4/2A作為連接肽,由CaMV35S啟動子驅動.利用農桿菌介導法將6箇植物錶達載體轉入煙草,得到再生植株529株.經PCR檢測,有261株再生苗為暘性植株,轉化率達到49.3％.穫得的轉基因煙草可用于分析連接肽2A和LP4/2A的剪切效率以及不同基因與連接肽連接位置差異對基因錶達的影響.
수착식물기인공정적발전,장다개기인전화식주이성위연구적열점지일,이용련접태진행다개기인융합적책략사인기엄범관주.이용련접다태2A화LP4/2A분별장항충기인Bt(Bacillus thuringiensis,Bt) cry1Ah화내혁감련기인mG2epsps련접기래,구건료4개융합기인표체재체pHAG、pHLAG、pGAH、pGLAH화량개단기인재체pSAh、pSmG2,기중pHAG、pHLAG시Bt cry1Ah기인재전,mG2-epsps기인재후,pGAH、pGLAH시mG2-epsps기인재전,Bt cry1Ah기인재후,분별용2A화LP4/2A작위련접태,유CaMV35S계동자구동.이용농간균개도법장6개식물표체재체전입연초,득도재생식주529주.경PCR검측,유261주재생묘위양성식주,전화솔체도49.3％.획득적전기인연초가용우분석련접태2A화LP4/2A적전절효솔이급불동기인여련접태련접위치차이대기인표체적영향.
