生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2011年
10期
97-100
,共4页
张超%张玉环%贾培义%董丽
張超%張玉環%賈培義%董麗
장초%장옥배%가배의%동려
牡丹%ACC合成酶基因%克隆%原核表达
牡丹%ACC閤成酶基因%剋隆%原覈錶達
모단%ACC합성매기인%극륭%원핵표체
从牡丹‘洛阳红’(Paeonia suffruticosa‘ Luo Yang Hong’)花瓣中提取总RNA,根据GenBank上牡丹ACC合成酶基因PsACS的序列设计引物,通过RT-PCR获得牡丹PsACS1基因序列,包含一个1 479 bp的开放阅读框,编码492个氨基酸.将PsACS1基因cDNA片段与pET28a(+)构建原核表达载体pET-ACS1,转化大肠杆菌E.coli BL21 (DE3).0.4 mmol/LIPTG诱导3h后,在预期的蛋白分子量55 kD处出现1条表达加强的蛋白条带.为进一步目的蛋白的纯化和鉴定提供试验基础.
從牡丹‘洛暘紅’(Paeonia suffruticosa‘ Luo Yang Hong’)花瓣中提取總RNA,根據GenBank上牡丹ACC閤成酶基因PsACS的序列設計引物,通過RT-PCR穫得牡丹PsACS1基因序列,包含一箇1 479 bp的開放閱讀框,編碼492箇氨基痠.將PsACS1基因cDNA片段與pET28a(+)構建原覈錶達載體pET-ACS1,轉化大腸桿菌E.coli BL21 (DE3).0.4 mmol/LIPTG誘導3h後,在預期的蛋白分子量55 kD處齣現1條錶達加彊的蛋白條帶.為進一步目的蛋白的純化和鑒定提供試驗基礎.
종모단‘락양홍’(Paeonia suffruticosa‘ Luo Yang Hong’)화판중제취총RNA,근거GenBank상모단ACC합성매기인PsACS적서렬설계인물,통과RT-PCR획득모단PsACS1기인서렬,포함일개1 479 bp적개방열독광,편마492개안기산.장PsACS1기인cDNA편단여pET28a(+)구건원핵표체재체pET-ACS1,전화대장간균E.coli BL21 (DE3).0.4 mmol/LIPTG유도3h후,재예기적단백분자량55 kD처출현1조표체가강적단백조대.위진일보목적단백적순화화감정제공시험기출.
