生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2012年
4期
497-502
,共6页
何子阳%朱凌云%毛德奎%王秀冬%于爱平%吴祖泽
何子暘%硃凌雲%毛德奎%王秀鼕%于愛平%吳祖澤
하자양%주릉운%모덕규%왕수동%우애평%오조택
蛋白酶活化受体1%凝血酶%肺癌%迁移%黏附%克隆形成%胶原收缩
蛋白酶活化受體1%凝血酶%肺癌%遷移%黏附%剋隆形成%膠原收縮
단백매활화수체1%응혈매%폐암%천이%점부%극륭형성%효원수축
目的:探讨蛋白酶活化受体1(PAR1)在凝血酶促进肺癌细胞迁移、黏附、克隆形成及胶原收缩中的作用.方法:将本实验室已构建的重组干扰载体pSilence-shPAR1和过表达载体pIRES-EGFP-PAR1分别转入人肺癌细胞PLA-801D和PLA-801C中,采用反转录PCR和实时荧光定量PCR方法检测细胞中PAR1的表达量,Transwell实验检测细胞的迁移能力,细胞黏附实验检测细胞对细胞外基质的黏附能力,克隆形成实验检测细胞的增殖能力,胶原收缩实验评价细胞对细胞外基质的重塑能力.结果:PAR1高表达(PLA-801C-pIRES-EGFP-PAR1)可明显增强PLA-801C细胞的迁移、黏附和胶原收缩能力(P＜0.05,P＜0.001),而PAR1被有效干扰后(PLA-801D-pSilence-shPAR1),PLA-801D细胞的迁移、黏附和胶原收缩能力显著减弱(P＜0.05,P＜0.001),而且PAR1的表达量直接与PLA-801D和PLA-801C细胞的克隆形成能力呈正相关.结论:PAR1在凝血酶促进肺癌细胞的黏附、迁移增殖和细胞外基质重塑等功能中发挥着重要作用,为以PAR1为靶的抗肿瘤治疗提供了理论基础.
目的:探討蛋白酶活化受體1(PAR1)在凝血酶促進肺癌細胞遷移、黏附、剋隆形成及膠原收縮中的作用.方法:將本實驗室已構建的重組榦擾載體pSilence-shPAR1和過錶達載體pIRES-EGFP-PAR1分彆轉入人肺癌細胞PLA-801D和PLA-801C中,採用反轉錄PCR和實時熒光定量PCR方法檢測細胞中PAR1的錶達量,Transwell實驗檢測細胞的遷移能力,細胞黏附實驗檢測細胞對細胞外基質的黏附能力,剋隆形成實驗檢測細胞的增殖能力,膠原收縮實驗評價細胞對細胞外基質的重塑能力.結果:PAR1高錶達(PLA-801C-pIRES-EGFP-PAR1)可明顯增彊PLA-801C細胞的遷移、黏附和膠原收縮能力(P＜0.05,P＜0.001),而PAR1被有效榦擾後(PLA-801D-pSilence-shPAR1),PLA-801D細胞的遷移、黏附和膠原收縮能力顯著減弱(P＜0.05,P＜0.001),而且PAR1的錶達量直接與PLA-801D和PLA-801C細胞的剋隆形成能力呈正相關.結論:PAR1在凝血酶促進肺癌細胞的黏附、遷移增殖和細胞外基質重塑等功能中髮揮著重要作用,為以PAR1為靶的抗腫瘤治療提供瞭理論基礎.
목적:탐토단백매활화수체1(PAR1)재응혈매촉진폐암세포천이、점부、극륭형성급효원수축중적작용.방법:장본실험실이구건적중조간우재체pSilence-shPAR1화과표체재체pIRES-EGFP-PAR1분별전입인폐암세포PLA-801D화PLA-801C중,채용반전록PCR화실시형광정량PCR방법검측세포중PAR1적표체량,Transwell실험검측세포적천이능력,세포점부실험검측세포대세포외기질적점부능력,극륭형성실험검측세포적증식능력,효원수축실험평개세포대세포외기질적중소능력.결과:PAR1고표체(PLA-801C-pIRES-EGFP-PAR1)가명현증강PLA-801C세포적천이、점부화효원수축능력(P＜0.05,P＜0.001),이PAR1피유효간우후(PLA-801D-pSilence-shPAR1),PLA-801D세포적천이、점부화효원수축능력현저감약(P＜0.05,P＜0.001),이차PAR1적표체량직접여PLA-801D화PLA-801C세포적극륭형성능력정정상관.결론:PAR1재응혈매촉진폐암세포적점부、천이증식화세포외기질중소등공능중발휘착중요작용,위이PAR1위파적항종류치료제공료이론기출.
