安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
24期
12276-12278
,共3页
刘顺枝%邓剑锋%田长恩%王小兰%胡位荣
劉順枝%鄧劍鋒%田長恩%王小蘭%鬍位榮
류순지%산검봉%전장은%왕소란%호위영
大肠杆菌%PCR反应%正交设计%条件优化%实验教学
大腸桿菌%PCR反應%正交設計%條件優化%實驗教學
대장간균%PCR반응%정교설계%조건우화%실험교학
采用碱裂解法提取大肠杆菌的质粒DNA,检测提取到的DNA浓度和纯度,并以提取的DNA作为PCR反应体系中的模板,采用搜索性正交设计试验法探求PCR反应体系中4个因素(dNTPs、DNA模板、引物和Taq酶)在5个水平上的最适用量,在此基础上,进一步设计细调性正交试验筛选PCR反应的最适条件.结果表明,在20μlPCR反应体系中,DNA模板5 ng/μl,dNTPs 0.25 mmol/L,引物0.6μmol/L,Taq酶1.5 U/μl,Mg2+浓度1.5 mmol/L时,PCR的效果最好.
採用堿裂解法提取大腸桿菌的質粒DNA,檢測提取到的DNA濃度和純度,併以提取的DNA作為PCR反應體繫中的模闆,採用搜索性正交設計試驗法探求PCR反應體繫中4箇因素(dNTPs、DNA模闆、引物和Taq酶)在5箇水平上的最適用量,在此基礎上,進一步設計細調性正交試驗篩選PCR反應的最適條件.結果錶明,在20μlPCR反應體繫中,DNA模闆5 ng/μl,dNTPs 0.25 mmol/L,引物0.6μmol/L,Taq酶1.5 U/μl,Mg2+濃度1.5 mmol/L時,PCR的效果最好.
채용감렬해법제취대장간균적질립DNA,검측제취도적DNA농도화순도,병이제취적DNA작위PCR반응체계중적모판,채용수색성정교설계시험법탐구PCR반응체계중4개인소(dNTPs、DNA모판、인물화Taq매)재5개수평상적최괄용량,재차기출상,진일보설계세조성정교시험사선PCR반응적최괄조건.결과표명,재20μlPCR반응체계중,DNA모판5 ng/μl,dNTPs 0.25 mmol/L,인물0.6μmol/L,Taq매1.5 U/μl,Mg2+농도1.5 mmol/L시,PCR적효과최호.