眼科研究
眼科研究
안과연구
CHINESE OPHTHALMIC RESEARCH
2009年
3期
161-165
,共5页
牛静宜%陈鹏%王晔%谢立信%王宜强
牛靜宜%陳鵬%王曄%謝立信%王宜彊
우정의%진붕%왕엽%사립신%왕의강
TGFBI%构建%真核表达载体%角膜营养不良
TGFBI%構建%真覈錶達載體%角膜營養不良
TGFBI%구건%진핵표체재체%각막영양불량
目的 构建小鼠TGFBI基因的真核表达载体,为研究角膜营养不良的发病机制奠定基础.方法 提取BALB/cBy小鼠正常角膜组织总RNA,经反转录-PCR合成TGFBI cDNA,克隆入真核表达载体pcDNA3.1并测序验证.用不同剂量重组质粒pcDNA3.1-TGFBI转染NIH3T3细胞,通过SYBR荧光实时定量PCR和Western blot检测TGFBI在细胞中的表达.结果 测序结果 显示扩增到的TGFBI cDNA以正确序列和方式插入载体,实时定量PCR和Western blot结果 显示TGFBI在NIH3T3细胞中表达增强.结论 成功构建了小鼠TGFBI基因真核表达载体,并在细胞中进行表达,为进一步研究TGFBI在角膜内的生理、病理功能奠定基础.
目的 構建小鼠TGFBI基因的真覈錶達載體,為研究角膜營養不良的髮病機製奠定基礎.方法 提取BALB/cBy小鼠正常角膜組織總RNA,經反轉錄-PCR閤成TGFBI cDNA,剋隆入真覈錶達載體pcDNA3.1併測序驗證.用不同劑量重組質粒pcDNA3.1-TGFBI轉染NIH3T3細胞,通過SYBR熒光實時定量PCR和Western blot檢測TGFBI在細胞中的錶達.結果 測序結果 顯示擴增到的TGFBI cDNA以正確序列和方式插入載體,實時定量PCR和Western blot結果 顯示TGFBI在NIH3T3細胞中錶達增彊.結論 成功構建瞭小鼠TGFBI基因真覈錶達載體,併在細胞中進行錶達,為進一步研究TGFBI在角膜內的生理、病理功能奠定基礎.
목적 구건소서TGFBI기인적진핵표체재체,위연구각막영양불량적발병궤제전정기출.방법 제취BALB/cBy소서정상각막조직총RNA,경반전록-PCR합성TGFBI cDNA,극륭입진핵표체재체pcDNA3.1병측서험증.용불동제량중조질립pcDNA3.1-TGFBI전염NIH3T3세포,통과SYBR형광실시정량PCR화Western blot검측TGFBI재세포중적표체.결과 측서결과 현시확증도적TGFBI cDNA이정학서렬화방식삽입재체,실시정량PCR화Western blot결과 현시TGFBI재NIH3T3세포중표체증강.결론 성공구건료소서TGFBI기인진핵표체재체,병재세포중진행표체,위진일보연구TGFBI재각막내적생리、병리공능전정기출.
