中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2003年
12期
964-968
,共5页
李蕾%王润田%王兆源%杨永杰%葛锡锐%王蕙芬
李蕾%王潤田%王兆源%楊永傑%葛錫銳%王蕙芬
리뢰%왕윤전%왕조원%양영걸%갈석예%왕혜분
IL-18%IL-1β转换酶%IL-2%基因克隆%转染%真核表达%小鼠
IL-18%IL-1β轉換酶%IL-2%基因剋隆%轉染%真覈錶達%小鼠
IL-18%IL-1β전환매%IL-2%기인극륭%전염%진핵표체%소서
目的构建模拟小鼠IL-18(mIL-18)天然生成真核表达体系,并探讨其与人IL-2(hIL-2)真核表达载体pVR1012-hIL-2(phIL-2)体内外共转染对细胞免疫功能的影响.方法分别构建小鼠IL-18前体(mproIL-18)和小鼠IL-1β转换酶(mICE)的真核表达载体pVR1012-mproIL-18(pmproIL-18)和pEGFP-N1-mICE(pmICE).两者单独或共转染COS-7细胞,分别在mRNA和蛋白水平检测IL-18的表达;将pmproIL-18、pmICE和phIL-2 3种真核表达载体分别通过体内、外共转染,初步检测其生物学活性.结果pmproIL-18及pmICE构建正确,分别转染COS-7细胞后能检测到相应mRNA表达.在pm-proIL-18单独或pmproIL-18/pmICE共转染的COS-7细胞中能检测到前体和成熟2种不同形式的mIL-18蛋白表达,并且mIL-18能分泌到上清;所分泌的mIL-18与hIL-2体外联合作用可增强小鼠脾细胞增殖能力.pmproIL-18、pmICE和phIL-2 3种真核表达载体联合肌肉注射的小鼠脾细胞体外杀伤同基因型肿瘤细胞的能力显著提高.结论构建的模拟mIL-18天然生成的真核表达体系(pmproIL-18/pmICE)与phIL-2共转染有可能用于肿瘤的基因治疗.
目的構建模擬小鼠IL-18(mIL-18)天然生成真覈錶達體繫,併探討其與人IL-2(hIL-2)真覈錶達載體pVR1012-hIL-2(phIL-2)體內外共轉染對細胞免疫功能的影響.方法分彆構建小鼠IL-18前體(mproIL-18)和小鼠IL-1β轉換酶(mICE)的真覈錶達載體pVR1012-mproIL-18(pmproIL-18)和pEGFP-N1-mICE(pmICE).兩者單獨或共轉染COS-7細胞,分彆在mRNA和蛋白水平檢測IL-18的錶達;將pmproIL-18、pmICE和phIL-2 3種真覈錶達載體分彆通過體內、外共轉染,初步檢測其生物學活性.結果pmproIL-18及pmICE構建正確,分彆轉染COS-7細胞後能檢測到相應mRNA錶達.在pm-proIL-18單獨或pmproIL-18/pmICE共轉染的COS-7細胞中能檢測到前體和成熟2種不同形式的mIL-18蛋白錶達,併且mIL-18能分泌到上清;所分泌的mIL-18與hIL-2體外聯閤作用可增彊小鼠脾細胞增殖能力.pmproIL-18、pmICE和phIL-2 3種真覈錶達載體聯閤肌肉註射的小鼠脾細胞體外殺傷同基因型腫瘤細胞的能力顯著提高.結論構建的模擬mIL-18天然生成的真覈錶達體繫(pmproIL-18/pmICE)與phIL-2共轉染有可能用于腫瘤的基因治療.
목적구건모의소서IL-18(mIL-18)천연생성진핵표체체계,병탐토기여인IL-2(hIL-2)진핵표체재체pVR1012-hIL-2(phIL-2)체내외공전염대세포면역공능적영향.방법분별구건소서IL-18전체(mproIL-18)화소서IL-1β전환매(mICE)적진핵표체재체pVR1012-mproIL-18(pmproIL-18)화pEGFP-N1-mICE(pmICE).량자단독혹공전염COS-7세포,분별재mRNA화단백수평검측IL-18적표체;장pmproIL-18、pmICE화phIL-2 3충진핵표체재체분별통과체내、외공전염,초보검측기생물학활성.결과pmproIL-18급pmICE구건정학,분별전염COS-7세포후능검측도상응mRNA표체.재pm-proIL-18단독혹pmproIL-18/pmICE공전염적COS-7세포중능검측도전체화성숙2충불동형식적mIL-18단백표체,병차mIL-18능분비도상청;소분비적mIL-18여hIL-2체외연합작용가증강소서비세포증식능력.pmproIL-18、pmICE화phIL-2 3충진핵표체재체연합기육주사적소서비세포체외살상동기인형종류세포적능력현저제고.결론구건적모의mIL-18천연생성적진핵표체체계(pmproIL-18/pmICE)여phIL-2공전염유가능용우종류적기인치료.
