细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2007年
1期
64-67
,共4页
王臣%侯利华%杜桂鑫%李建明%陈溥言%童贻刚
王臣%侯利華%杜桂鑫%李建明%陳溥言%童貽剛
왕신%후리화%두계흠%리건명%진부언%동이강
噬菌体抗体库%整合素ανβ3%人源化Fab
噬菌體抗體庫%整閤素ανβ3%人源化Fab
서균체항체고%정합소ανβ3%인원화Fab
目的:构建预设CDR3基因的噬菌体抗体库, 通过抗原表位导向选择方法筛选抗人整合素ανβ3单克隆抗体(mAb)人源化Fab.方法:将鼠mAb LCDR3重组到人轻链可变区文库中并与人/鼠嵌合重链Fd基因配对构建杂合噬菌体抗体库, 用固相人整合素ανβ3抗原筛选人源化轻链基因.再用所获人轻链基因与移植有鼠mAb HCDR3的人重链Fd基因配对构建人源噬菌体抗体库, 筛选人源化Fab.结果:分别构建了库容为2.1×106和2×107的杂合噬菌体抗体库和人源噬菌体抗体库, 筛选到3株人源Fab克隆.经间接ELISA及竞争抑制ELISA证实, 能特异结合整合素ανβ3抗原, 其中人源D5株Fab克隆的基因序列表明, 人轻链可变区基因属VKIII亚群, 人重链可变区基因属VH1亚群.结论:利用噬菌体抗体库技术, 成功地进行了鼠抗人整合素ανβ3 mAb E10人源化的改造, 为进一步临床应用奠定了基础.
目的:構建預設CDR3基因的噬菌體抗體庫, 通過抗原錶位導嚮選擇方法篩選抗人整閤素ανβ3單剋隆抗體(mAb)人源化Fab.方法:將鼠mAb LCDR3重組到人輕鏈可變區文庫中併與人/鼠嵌閤重鏈Fd基因配對構建雜閤噬菌體抗體庫, 用固相人整閤素ανβ3抗原篩選人源化輕鏈基因.再用所穫人輕鏈基因與移植有鼠mAb HCDR3的人重鏈Fd基因配對構建人源噬菌體抗體庫, 篩選人源化Fab.結果:分彆構建瞭庫容為2.1×106和2×107的雜閤噬菌體抗體庫和人源噬菌體抗體庫, 篩選到3株人源Fab剋隆.經間接ELISA及競爭抑製ELISA證實, 能特異結閤整閤素ανβ3抗原, 其中人源D5株Fab剋隆的基因序列錶明, 人輕鏈可變區基因屬VKIII亞群, 人重鏈可變區基因屬VH1亞群.結論:利用噬菌體抗體庫技術, 成功地進行瞭鼠抗人整閤素ανβ3 mAb E10人源化的改造, 為進一步臨床應用奠定瞭基礎.
목적:구건예설CDR3기인적서균체항체고, 통과항원표위도향선택방법사선항인정합소ανβ3단극륭항체(mAb)인원화Fab.방법:장서mAb LCDR3중조도인경련가변구문고중병여인/서감합중련Fd기인배대구건잡합서균체항체고, 용고상인정합소ανβ3항원사선인원화경련기인.재용소획인경련기인여이식유서mAb HCDR3적인중련Fd기인배대구건인원서균체항체고, 사선인원화Fab.결과:분별구건료고용위2.1×106화2×107적잡합서균체항체고화인원서균체항체고, 사선도3주인원Fab극륭.경간접ELISA급경쟁억제ELISA증실, 능특이결합정합소ανβ3항원, 기중인원D5주Fab극륭적기인서렬표명, 인경련가변구기인속VKIII아군, 인중련가변구기인속VH1아군.결론:이용서균체항체고기술, 성공지진행료서항인정합소ανβ3 mAb E10인원화적개조, 위진일보림상응용전정료기출.
