CAJ | 학술논문

目的:研究兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的体外分离、培养及向心肌细胞诱导分化的条件.方法:抽取兔髂骨骨髓,用密度梯度离心法和贴壁培养法分离、纯化MSCs,第3代细胞(P3)用流式细胞术检测细胞表面抗原CD34、CD45、CD11b,CD90、CD29.以l0μmol/L 5-氮胞苷(5-aza)进行诱导分化,4周后,用倒置显微镜、透射电镜观察MSCs形态学变化及超微结构特征,RT-PCR检测心肌特异性β-肌球蛋白重链(β-MHC)、肌钙蛋白I(cTnl)的表达.结果:兔MSCs呈贴壁集落生长,流式细胞术检测显示P3细胞均一性在97%以上,纯度较高.诱导后细胞体积较诱导前增大,更加细长.l4天后细胞之间出现连接,排列方向渐趋一致.4周后,透射电镜下有肌丝、心房特殊颗粒及线粒体等心肌细胞超微结构形成.RT-PCR显示β-MHC、cTnl呈阳性反应.结论:MSCs在体外经5-aza诱导可以向心肌细胞进行分化.
목적:연구토골수간충질간세포(MSCs)적체외분리、배양급향심기세포유도분화적조건.방법:추취토가골골수,용밀도제도리심법화첩벽배양법분리、순화MSCs,제3대세포(P3)용류식세포술검측세포표면항원CD34、CD45、CD11b,CD90、CD29.이l0μmol/L 5-담포감(5-aza)진행유도분화,4주후,용도치현미경、투사전경관찰MSCs형태학변화급초미결구특정,RT-PCR검측심기특이성β-기구단백중련(β-MHC)、기개단백I(cTnl)적표체.결과:토MSCs정첩벽집락생장,류식세포술검측현시P3세포균일성재97%이상,순도교고.유도후세포체적교유도전증대,경가세장.l4천후세포지간출현련접,배렬방향점추일치.4주후,투사전경하유기사、심방특수과립급선립체등심기세포초미결구형성.RT-PCR현시β-MHC、cTnl정양성반응.결론:MSCs재체외경5-aza유도가이향심기세포진행분화.