蚕业科学
蠶業科學
잠업과학
ACTA SERICOLOGICA SINICA
2008年
3期
453-458
,共6页
付艳红%唐顺明%覃光星%刘挺%郭锡杰
付豔紅%唐順明%覃光星%劉挺%郭錫傑
부염홍%당순명%담광성%류정%곽석걸
家蚕%浓核病毒%重组质粒%病毒拯救
傢蠶%濃覈病毒%重組質粒%病毒拯救
가잠%농핵병독%중조질립%병독증구
家蚕浓核病毒中国(镇江)株(Bombyx mori Densovirus Zhenjiang Strain, BmDNV-ZJ)包含VD1和VD2共2种基因组DNA.以BmDNV-ZJ感染家蚕中肠总DNA为模板,采用PCR方法扩增得到2种DNA,并将其克隆到质粒pGEM-T构建了重组质粒pGEM-VD1和pGEM-VD2.采用DEAE-dextran转染技术,将2种重组质粒分别导入家蚕幼虫体内,能使家蚕幼虫发病,免疫双向扩散和免疫酶组化法检测都能检出阳性反应,但转染pGEM-VD2重组质粒的家蚕幼虫发病率较低.通过重组质粒转染方法,可以使BmDNV-ZJ感受性品种和抵抗性品种都发病,但感受性品种的发病率较高.将重组质粒转染发病蚕的中肠匀浆,取上清液经口接种健康蚕幼虫,也能使其发病.上述结果表明,携带BmDNV-ZJ DNA的重组质粒在家蚕幼虫体内拯救出了感染性的病毒粒子.
傢蠶濃覈病毒中國(鎮江)株(Bombyx mori Densovirus Zhenjiang Strain, BmDNV-ZJ)包含VD1和VD2共2種基因組DNA.以BmDNV-ZJ感染傢蠶中腸總DNA為模闆,採用PCR方法擴增得到2種DNA,併將其剋隆到質粒pGEM-T構建瞭重組質粒pGEM-VD1和pGEM-VD2.採用DEAE-dextran轉染技術,將2種重組質粒分彆導入傢蠶幼蟲體內,能使傢蠶幼蟲髮病,免疫雙嚮擴散和免疫酶組化法檢測都能檢齣暘性反應,但轉染pGEM-VD2重組質粒的傢蠶幼蟲髮病率較低.通過重組質粒轉染方法,可以使BmDNV-ZJ感受性品種和牴抗性品種都髮病,但感受性品種的髮病率較高.將重組質粒轉染髮病蠶的中腸勻漿,取上清液經口接種健康蠶幼蟲,也能使其髮病.上述結果錶明,攜帶BmDNV-ZJ DNA的重組質粒在傢蠶幼蟲體內拯救齣瞭感染性的病毒粒子.
가잠농핵병독중국(진강)주(Bombyx mori Densovirus Zhenjiang Strain, BmDNV-ZJ)포함VD1화VD2공2충기인조DNA.이BmDNV-ZJ감염가잠중장총DNA위모판,채용PCR방법확증득도2충DNA,병장기극륭도질립pGEM-T구건료중조질립pGEM-VD1화pGEM-VD2.채용DEAE-dextran전염기술,장2충중조질립분별도입가잠유충체내,능사가잠유충발병,면역쌍향확산화면역매조화법검측도능검출양성반응,단전염pGEM-VD2중조질립적가잠유충발병솔교저.통과중조질립전염방법,가이사BmDNV-ZJ감수성품충화저항성품충도발병,단감수성품충적발병솔교고.장중조질립전염발병잠적중장균장,취상청액경구접충건강잠유충,야능사기발병.상술결과표명,휴대BmDNV-ZJ DNA적중조질립재가잠유충체내증구출료감염성적병독입자.
