山西医科大学学报
山西醫科大學學報
산서의과대학학보
JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY
2009年
5期
393-397,477
,共6页
周彤%毛晓波%毛奕%柳强妮%曾秋棠
週彤%毛曉波%毛奕%柳彊妮%曾鞦棠
주동%모효파%모혁%류강니%증추당
膜片钳%耐钙心室肌细胞%L-型钙通道电流(ICa-L)%延迟整流钾电流(IK)
膜片鉗%耐鈣心室肌細胞%L-型鈣通道電流(ICa-L)%延遲整流鉀電流(IK)
막편겸%내개심실기세포%L-형개통도전류(ICa-L)%연지정류갑전류(IK)
目的 探讨细胞外液成分对获取适于电生理研究的耐钙心室肌细胞及对L-型钙通道电流(ICa-L)、延迟整流钾电流(IK)记录的影响. 方法 家兔心室肌细胞急性分离采用Langendorff灌流装置及酶解分离技术,心脏灌流前实验组细胞外液为正常台氏液,对照组细胞外液为无钙台氏液,观察细胞外液中的钙离子对获取适于电生理记录的单个耐钙心肌细胞的影响;应用全细胞膜片钳技术,实验组分别以含BaCl2的台氏液及N-甲基-D-葡萄糖胺(NMDG)溶液作为细胞外液记录ICa-L及IK,对照组为正常台氏液. 结果与对照组相比较,实验组心室肌细胞存活率和耐钙心肌细胞存活率均明显升高(71% ±9.7% vs 55% ±10% ;52%±7.9% vs 39%±11% ,n=10,P＜0.05);实验组引出的ICa-L峰值电流大于对照组,且幅值稳定;实验组IK时间依赖性外向电流及尾电流随去极化时间延长增大作用更明显(1.39±0.05 pA/pF vs 0.53±0.14 pA/pF; 0.74±0.09 pA/pF vs 0.39±0.13 pA/pF,n=10,P<0.05).结论 细胞外液中的钙离子有助于获取耐钙心肌细胞,以含BaCl2的台氏液及NMDG溶液作为细胞外液易于获得典型而稳定的ICa-L及IK.
目的 探討細胞外液成分對穫取適于電生理研究的耐鈣心室肌細胞及對L-型鈣通道電流(ICa-L)、延遲整流鉀電流(IK)記錄的影響. 方法 傢兔心室肌細胞急性分離採用Langendorff灌流裝置及酶解分離技術,心髒灌流前實驗組細胞外液為正常檯氏液,對照組細胞外液為無鈣檯氏液,觀察細胞外液中的鈣離子對穫取適于電生理記錄的單箇耐鈣心肌細胞的影響;應用全細胞膜片鉗技術,實驗組分彆以含BaCl2的檯氏液及N-甲基-D-葡萄糖胺(NMDG)溶液作為細胞外液記錄ICa-L及IK,對照組為正常檯氏液. 結果與對照組相比較,實驗組心室肌細胞存活率和耐鈣心肌細胞存活率均明顯升高(71% ±9.7% vs 55% ±10% ;52%±7.9% vs 39%±11% ,n=10,P＜0.05);實驗組引齣的ICa-L峰值電流大于對照組,且幅值穩定;實驗組IK時間依賴性外嚮電流及尾電流隨去極化時間延長增大作用更明顯(1.39±0.05 pA/pF vs 0.53±0.14 pA/pF; 0.74±0.09 pA/pF vs 0.39±0.13 pA/pF,n=10,P<0.05).結論 細胞外液中的鈣離子有助于穫取耐鈣心肌細胞,以含BaCl2的檯氏液及NMDG溶液作為細胞外液易于穫得典型而穩定的ICa-L及IK.
목적 탐토세포외액성분대획취괄우전생리연구적내개심실기세포급대L-형개통도전류(ICa-L)、연지정류갑전류(IK)기록적영향. 방법 가토심실기세포급성분리채용Langendorff관류장치급매해분리기술,심장관류전실험조세포외액위정상태씨액,대조조세포외액위무개태씨액,관찰세포외액중적개리자대획취괄우전생리기록적단개내개심기세포적영향;응용전세포막편겸기술,실험조분별이함BaCl2적태씨액급N-갑기-D-포도당알(NMDG)용액작위세포외액기록ICa-L급IK,대조조위정상태씨액. 결과여대조조상비교,실험조심실기세포존활솔화내개심기세포존활솔균명현승고(71% ±9.7% vs 55% ±10% ;52%±7.9% vs 39%±11% ,n=10,P＜0.05);실험조인출적ICa-L봉치전류대우대조조,차폭치은정;실험조IK시간의뢰성외향전류급미전류수거겁화시간연장증대작용경명현(1.39±0.05 pA/pF vs 0.53±0.14 pA/pF; 0.74±0.09 pA/pF vs 0.39±0.13 pA/pF,n=10,P<0.05).결론 세포외액중적개리자유조우획취내개심기세포,이함BaCl2적태씨액급NMDG용액작위세포외액역우획득전형이은정적ICa-L급IK.
