湖南师范大学学报（医学版）
湖南師範大學學報（醫學版）
호남사범대학학보（의학판）
JOURNAL OF HUNAN NORMAL UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2010年
1期
17-21
,共5页
袁仕善%孙文霞%陈婧%唐小异%鄢慧
袁仕善%孫文霞%陳婧%唐小異%鄢慧
원사선%손문하%진청%당소이%언혜
弓形虫%致密颗粒蛋白7%表达%抗原性
弓形蟲%緻密顆粒蛋白7%錶達%抗原性
궁형충%치밀과립단백7%표체%항원성
目的:重组表达弓形虫致密颗粒蛋白7(GRA7),分析其免疫活性.方法:采用聚合酶链反应(PCR)从刚地弓形虫基因组DNA中扩增GRA7基因,经克隆和测序分析后,亚克隆至表达载体pET-23a(+),转化大肠埃希菌BL21,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达GRA7,用His-bindTM亲和层析柱纯化,免疫印迹和小鼠免疫分析其抗原性.结果:PCR扩增出大小约660bp的GRA7基因片段,并被亚克隆到原核表达载体PET-23a(+),构建了原核重组表达质粒pET-GRA7;表达纯化获得分子量约29,000的重组GRA7;重组GRA7能被弓形虫感染兔血清所识别,并诱导小鼠产生抗体滴度达1:12800.结论:获得了具有良好免疫学活性的重组抗原GRA7.
目的:重組錶達弓形蟲緻密顆粒蛋白7(GRA7),分析其免疫活性.方法:採用聚閤酶鏈反應(PCR)從剛地弓形蟲基因組DNA中擴增GRA7基因,經剋隆和測序分析後,亞剋隆至錶達載體pET-23a(+),轉化大腸埃希菌BL21,異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導錶達GRA7,用His-bindTM親和層析柱純化,免疫印跡和小鼠免疫分析其抗原性.結果:PCR擴增齣大小約660bp的GRA7基因片段,併被亞剋隆到原覈錶達載體PET-23a(+),構建瞭原覈重組錶達質粒pET-GRA7;錶達純化穫得分子量約29,000的重組GRA7;重組GRA7能被弓形蟲感染兔血清所識彆,併誘導小鼠產生抗體滴度達1:12800.結論:穫得瞭具有良好免疫學活性的重組抗原GRA7.
목적:중조표체궁형충치밀과립단백7(GRA7),분석기면역활성.방법:채용취합매련반응(PCR)종강지궁형충기인조DNA중확증GRA7기인,경극륭화측서분석후,아극륭지표체재체pET-23a(+),전화대장애희균BL21,이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도표체GRA7,용His-bindTM친화층석주순화,면역인적화소서면역분석기항원성.결과:PCR확증출대소약660bp적GRA7기인편단,병피아극륭도원핵표체재체PET-23a(+),구건료원핵중조표체질립pET-GRA7;표체순화획득분자량약29,000적중조GRA7;중조GRA7능피궁형충감염토혈청소식별,병유도소서산생항체적도체1:12800.결론:획득료구유량호면역학활성적중조항원GRA7.
