四川大学学报（自然科学版）
四川大學學報（自然科學版）
사천대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SICHUAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE EDITION）
2012年
3期
710-714
,共5页
万谦%刘志斌%彭文珍%王健美%李旭峰%杨毅
萬謙%劉誌斌%彭文珍%王健美%李旭峰%楊毅
만겸%류지빈%팽문진%왕건미%리욱봉%양의
BnRCH%人胚胎肾细胞HEK293A%人宫颈癌细胞Hela%瞬时转染%稳定转染
BnRCH%人胚胎腎細胞HEK293A%人宮頸癌細胞Hela%瞬時轉染%穩定轉染
BnRCH%인배태신세포HEK293A%인궁경암세포Hela%순시전염%은정전염
本研究从植物基因在动物细胞异源表达的角度入手,采用外源基因稳定转染的方法,向人胚胎肾细胞HEK 293A和人宫颈癌细胞Hela导入了BnRCH基因,获得了HEK 293A 和Hela细胞的稳定转染子.使用RT-PCR、qPCR和Western blot等方法鉴定了获得的稳定转染子,确认了稳定转染子的成功建立.本研究一方面说明BnRCH虽然为植物基因,却仍然能够在动物细胞中正常表达；另一方面也为开展对BnRCH基因在动物细胞中的功能研究和应用开发建立了平台.同时,使用免疫细胞化学法和绿色荧光蛋白质(GFP)示踪法分析了BnRCH蛋白质在Hela细胞中的定位,结果表明:BnRCH蛋白质在Hela细胞中均匀分布,实现了对BnRCH基因在Hela细胞中作用的初步探索.
本研究從植物基因在動物細胞異源錶達的角度入手,採用外源基因穩定轉染的方法,嚮人胚胎腎細胞HEK 293A和人宮頸癌細胞Hela導入瞭BnRCH基因,穫得瞭HEK 293A 和Hela細胞的穩定轉染子.使用RT-PCR、qPCR和Western blot等方法鑒定瞭穫得的穩定轉染子,確認瞭穩定轉染子的成功建立.本研究一方麵說明BnRCH雖然為植物基因,卻仍然能夠在動物細胞中正常錶達；另一方麵也為開展對BnRCH基因在動物細胞中的功能研究和應用開髮建立瞭平檯.同時,使用免疫細胞化學法和綠色熒光蛋白質(GFP)示蹤法分析瞭BnRCH蛋白質在Hela細胞中的定位,結果錶明:BnRCH蛋白質在Hela細胞中均勻分佈,實現瞭對BnRCH基因在Hela細胞中作用的初步探索.
본연구종식물기인재동물세포이원표체적각도입수,채용외원기인은정전염적방법,향인배태신세포HEK 293A화인궁경암세포Hela도입료BnRCH기인,획득료HEK 293A 화Hela세포적은정전염자.사용RT-PCR、qPCR화Western blot등방법감정료획득적은정전염자,학인료은정전염자적성공건립.본연구일방면설명BnRCH수연위식물기인,각잉연능구재동물세포중정상표체；령일방면야위개전대BnRCH기인재동물세포중적공능연구화응용개발건립료평태.동시,사용면역세포화학법화록색형광단백질(GFP)시종법분석료BnRCH단백질재Hela세포중적정위,결과표명:BnRCH단백질재Hela세포중균균분포,실현료대BnRCH기인재Hela세포중작용적초보탐색.
