扬州大学学报(农业与生命科学版)
颺州大學學報(農業與生命科學版)
양주대학학보(농업여생명과학판)
JOURNAL OF YANGZHOU UNIVERSITY(AGRICULTURAL AND LIFE SCIENCE EDITION)
2012年
2期
1-5,10
,共6页
张钰%孙怀昌%黄燕燕%张鑫宇%夏晓莉
張鈺%孫懷昌%黃燕燕%張鑫宇%夏曉莉
장옥%손부창%황연연%장흠우%하효리
猪CD151%重组抗原%免疫血清%PRRSV%感染抑制
豬CD151%重組抗原%免疫血清%PRRSV%感染抑製
저CD151%중조항원%면역혈청%PRRSV%감염억제
用RT-PCR从猪巨噬细胞中扩增CD151胞外区编码序列,将其插人含细胞毒性T细胞相关抗原4胞外区序列的表达载体,重组载体转化大肠杆菌,SDS-PAGE检测重组蛋白表达;用包涵体纯化和尿素变性与复性法获得可溶性蛋白,纯化蛋白免疫小鼠,ELISA测定免疫血清抗体效价,Western-blot验证免疫血清特异性;以处理细胞或处理病毒方式,用免疫血清进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染抑制试验.结果表明:重组菌表达预期的32 ku重组蛋白,获得的可溶性重组蛋白纯度较高;免疫血清抗体效价达1 ∶ 170 000.在猪巨噬细胞中能检测到预期的29 ku蛋白,能抑制PRRSV感染MARC-145细胞,但有毒株差异性,处理病毒的感染抑制作用较强.结果提示猪CD151免疫血清能以结合细胞和结合病毒方式抑制PRRSV感染.
用RT-PCR從豬巨噬細胞中擴增CD151胞外區編碼序列,將其插人含細胞毒性T細胞相關抗原4胞外區序列的錶達載體,重組載體轉化大腸桿菌,SDS-PAGE檢測重組蛋白錶達;用包涵體純化和尿素變性與複性法穫得可溶性蛋白,純化蛋白免疫小鼠,ELISA測定免疫血清抗體效價,Western-blot驗證免疫血清特異性;以處理細胞或處理病毒方式,用免疫血清進行豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒(PRRSV)感染抑製試驗.結果錶明:重組菌錶達預期的32 ku重組蛋白,穫得的可溶性重組蛋白純度較高;免疫血清抗體效價達1 ∶ 170 000.在豬巨噬細胞中能檢測到預期的29 ku蛋白,能抑製PRRSV感染MARC-145細胞,但有毒株差異性,處理病毒的感染抑製作用較彊.結果提示豬CD151免疫血清能以結閤細胞和結閤病毒方式抑製PRRSV感染.
용RT-PCR종저거서세포중확증CD151포외구편마서렬,장기삽인함세포독성T세포상관항원4포외구서렬적표체재체,중조재체전화대장간균,SDS-PAGE검측중조단백표체;용포함체순화화뇨소변성여복성법획득가용성단백,순화단백면역소서,ELISA측정면역혈청항체효개,Western-blot험증면역혈청특이성;이처리세포혹처리병독방식,용면역혈청진행저번식여호흡종합정병독(PRRSV)감염억제시험.결과표명:중조균표체예기적32 ku중조단백,획득적가용성중조단백순도교고;면역혈청항체효개체1 ∶ 170 000.재저거서세포중능검측도예기적29 ku단백,능억제PRRSV감염MARC-145세포,단유독주차이성,처리병독적감염억제작용교강.결과제시저CD151면역혈청능이결합세포화결합병독방식억제PRRSV감염.