浙江大学学报（医学版）
浙江大學學報（醫學版）
절강대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY MEDICAL SCIENCES
2005年
5期
405-411
,共7页
螺杆菌,幽门/免疫学%IgA%重组,遗传%免疫疗法%螺杆菌感染/预防和控制%IgA,分泌/分析%尿素酶/生物合成%细胞黏附
螺桿菌,幽門/免疫學%IgA%重組,遺傳%免疫療法%螺桿菌感染/預防和控製%IgA,分泌/分析%尿素酶/生物閤成%細胞黏附
라간균,유문/면역학%IgA%중조,유전%면역요법%라간균감염/예방화공제%IgA,분비/분석%뇨소매/생물합성%세포점부
目的:了解内置重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(rLTB)佐剂、幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B亚单位(rUreB)和黏附素(rHpaA)双价基因工程疫苗对Hp SS1株感染BALB/c小鼠的保护作用及其机制.方法:采用NTA-Ni亲和层析法分别收集rUreB、rHpaA、rLTB-rUreB-rHpaA、重组大肠杆菌不耐热肠毒素A亚单位突变体(rLTKA63)、rLTB和霍乱肠毒素B亚单位(rCTB).用Western blot检测各重组蛋白抗原的免疫反应性.用GM1-ELISA检测rLTB、rCTB、rLTB-rUreB-rHpaA的佐剂活性.建立Hp SS1株感染BALB/c小鼠模型,检测不同组合抗原和佐剂的免疫保护效果.采用分离培养和镀银染色法检查感染小鼠胃窦组织中的Hp.建立ELISA,检测免疫小鼠特异性胃液S-IgA和血清IgA.结果:rUreB、rHpaA和rLTB-rUreB-rHpaA可被兔抗Hp全菌抗体识别,并与牛GM1结合.单用rUreB或rHpaA 免疫小鼠,其保护率低于70%;若与rLTB或rCTB合用,其保护率可增至75.0%～83.3%.在不同抗原及佐剂组合中,rLTB-rUreB-rHpaA保护率达100%,其次为rHpaA+rUreB+rCTB+rLTKA63(91.7%)和rUreB+rHpaA+rLTB(90.9%).rLTB和rCTB均有明显的诱生免疫小鼠特异性血清IgA和胃液S-IgA作用,但前者诱生S-IgA的能力强于后者.特异性血清IgA,尤其是胃液S-IgA的阳性率与小鼠免疫保护率基本吻合,rLTB-rUreB-rHpaA免疫小鼠rUreB 和rHpaA 特异性S-IgA阳性率分别高达100%和91.7%.结论:rUreB和rHpaA有良好的免疫反应性和抗原性,rLTB和rCTB有黏膜免疫佐剂活性.内置佐剂UreB和HpaA双价重组疫苗对小鼠高保护率与使用高剂量rLTB、抗原分子量增大和局部高水平特异性S-IgA抗体有关.
目的:瞭解內置重組大腸桿菌不耐熱腸毒素B亞單位(rLTB)佐劑、幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B亞單位(rUreB)和黏附素(rHpaA)雙價基因工程疫苗對Hp SS1株感染BALB/c小鼠的保護作用及其機製.方法:採用NTA-Ni親和層析法分彆收集rUreB、rHpaA、rLTB-rUreB-rHpaA、重組大腸桿菌不耐熱腸毒素A亞單位突變體(rLTKA63)、rLTB和霍亂腸毒素B亞單位(rCTB).用Western blot檢測各重組蛋白抗原的免疫反應性.用GM1-ELISA檢測rLTB、rCTB、rLTB-rUreB-rHpaA的佐劑活性.建立Hp SS1株感染BALB/c小鼠模型,檢測不同組閤抗原和佐劑的免疫保護效果.採用分離培養和鍍銀染色法檢查感染小鼠胃竇組織中的Hp.建立ELISA,檢測免疫小鼠特異性胃液S-IgA和血清IgA.結果:rUreB、rHpaA和rLTB-rUreB-rHpaA可被兔抗Hp全菌抗體識彆,併與牛GM1結閤.單用rUreB或rHpaA 免疫小鼠,其保護率低于70%;若與rLTB或rCTB閤用,其保護率可增至75.0%～83.3%.在不同抗原及佐劑組閤中,rLTB-rUreB-rHpaA保護率達100%,其次為rHpaA+rUreB+rCTB+rLTKA63(91.7%)和rUreB+rHpaA+rLTB(90.9%).rLTB和rCTB均有明顯的誘生免疫小鼠特異性血清IgA和胃液S-IgA作用,但前者誘生S-IgA的能力彊于後者.特異性血清IgA,尤其是胃液S-IgA的暘性率與小鼠免疫保護率基本吻閤,rLTB-rUreB-rHpaA免疫小鼠rUreB 和rHpaA 特異性S-IgA暘性率分彆高達100%和91.7%.結論:rUreB和rHpaA有良好的免疫反應性和抗原性,rLTB和rCTB有黏膜免疫佐劑活性.內置佐劑UreB和HpaA雙價重組疫苗對小鼠高保護率與使用高劑量rLTB、抗原分子量增大和跼部高水平特異性S-IgA抗體有關.
목적:료해내치중조대장간균불내열장독소B아단위(rLTB)좌제、유문라간균(Helicobacter pylori,Hp)뇨소매B아단위(rUreB)화점부소(rHpaA)쌍개기인공정역묘대Hp SS1주감염BALB/c소서적보호작용급기궤제.방법:채용NTA-Ni친화층석법분별수집rUreB、rHpaA、rLTB-rUreB-rHpaA、중조대장간균불내열장독소A아단위돌변체(rLTKA63)、rLTB화곽란장독소B아단위(rCTB).용Western blot검측각중조단백항원적면역반응성.용GM1-ELISA검측rLTB、rCTB、rLTB-rUreB-rHpaA적좌제활성.건립Hp SS1주감염BALB/c소서모형,검측불동조합항원화좌제적면역보호효과.채용분리배양화도은염색법검사감염소서위두조직중적Hp.건립ELISA,검측면역소서특이성위액S-IgA화혈청IgA.결과:rUreB、rHpaA화rLTB-rUreB-rHpaA가피토항Hp전균항체식별,병여우GM1결합.단용rUreB혹rHpaA 면역소서,기보호솔저우70%;약여rLTB혹rCTB합용,기보호솔가증지75.0%～83.3%.재불동항원급좌제조합중,rLTB-rUreB-rHpaA보호솔체100%,기차위rHpaA+rUreB+rCTB+rLTKA63(91.7%)화rUreB+rHpaA+rLTB(90.9%).rLTB화rCTB균유명현적유생면역소서특이성혈청IgA화위액S-IgA작용,단전자유생S-IgA적능력강우후자.특이성혈청IgA,우기시위액S-IgA적양성솔여소서면역보호솔기본문합,rLTB-rUreB-rHpaA면역소서rUreB 화rHpaA 특이성S-IgA양성솔분별고체100%화91.7%.결론:rUreB화rHpaA유량호적면역반응성화항원성,rLTB화rCTB유점막면역좌제활성.내치좌제UreB화HpaA쌍개중조역묘대소서고보호솔여사용고제량rLTB、항원분자량증대화국부고수평특이성S-IgA항체유관.
