CAJ | 학술논문

目的:通过检测阿魏酸钠对联合培养的神经细胞和巨噬细胞中神经细胞的乳酸脱氢酶漏出量和微管相关蛋白-2的影响,观察阿魏酸钠对淀粉样β蛋白激活巨噬细胞引起神经细胞损伤的保护作用.方法:实验于2004-05/12在锦州医学院药理实验室和解剖实验室完成.选择8～10周龄的小鼠进行巨噬细胞培养,出生两三天的大乳鼠进行神经细胞培养.单独培养的神经细胞和巨噬细胞:将加入10μmol/L淀粉样β蛋白和未加入淀粉样β蛋白的巨噬细胞上清液分别移入单独培养的神经细胞中,通过Hoechst 33258染色检测神经细胞的凋亡百分比.联合培养的神经细胞和巨噬细胞:联合培养24 h后,加入10 μmol/L的淀粉样β蛋白,阿魏酸钠组同时加入不同浓度(10 μmol/L,100μmol/L,500 μmol/L, 1 mmol/L)阿魏酸钠共孵育.48 h后,采用免疫组织化学方法和乳酸脱氢酶检测试剂盒检测微管相关蛋白-2表达水平和乳酸脱氢酶漏出量.结果:将淀粉样β蛋白激活的巨噬细胞上清液移入到单独培养的神经细胞48 h后,可使凋亡神经细胞的百分比明显增加,从正常11.3%增加到74.0%,(P＜0.01).在巨噬细胞和神经细胞联合培养中,淀粉样β蛋白组与空白对照组相比,乳酸脱氢酶漏出量明显增加,由375 nkat/L增加到2 859 nkat/L,微管相关蛋白-2表达阳性的神经元数目相应减少,与淀粉样β蛋白组相比,阿魏酸钠(10 μmol/L,100 μmol/L,500 μmol/L,1 mmol/L)能显著地降低乳酸脱氢酶漏出量,使微管相关蛋白-2表达阳性的神经细胞数目明显增加,呈剂量依赖性(P＜0.05).结论:①淀粉样β蛋白是通过激活巨噬细胞,使其释放毒性物质,从而引起神经细胞的损伤.②阿魏酸钠对淀粉样β蛋白引起的神经细胞损伤具有保护作用
목적:통과검측아위산납대연합배양적신경세포화거서세포중신경세포적유산탈경매루출량화미관상관단백-2적영향,관찰아위산납대정분양β단백격활거서세포인기신경세포손상적보호작용.방법:실험우2004-05/12재금주의학원약리실험실화해부실험실완성.선택8～10주령적소서진행거서세포배양,출생량삼천적대유서진행신경세포배양.단독배양적신경세포화거서세포:장가입10μmol/L정분양β단백화미가입정분양β단백적거서세포상청액분별이입단독배양적신경세포중,통과Hoechst 33258염색검측신경세포적조망백분비.연합배양적신경세포화거서세포:연합배양24 h후,가입10 μmol/L적정분양β단백,아위산납조동시가입불동농도(10 μmol/L,100μmol/L,500 μmol/L, 1 mmol/L)아위산납공부육.48 h후,채용면역조직화학방법화유산탈경매검측시제합검측미관상관단백-2표체수평화유산탈경매루출량.결과:장정분양β단백격활적거서세포상청액이입도단독배양적신경세포48 h후,가사조망신경세포적백분비명현증가,종정상11.3%증가도74.0%,(P＜0.01).재거서세포화신경세포연합배양중,정분양β단백조여공백대조조상비,유산탈경매루출량명현증가,유375 nkat/L증가도2 859 nkat/L,미관상관단백-2표체양성적신경원수목상응감소,여정분양β단백조상비,아위산납(10 μmol/L,100 μmol/L,500 μmol/L,1 mmol/L)능현저지강저유산탈경매루출량,사미관상관단백-2표체양성적신경세포수목명현증가,정제량의뢰성(P＜0.05).결론:①정분양β단백시통과격활거서세포,사기석방독성물질,종이인기신경세포적손상.②아위산납대정분양β단백인기적신경세포손상구유보호작용