禽流感病毒神经氨酸酶基因在重组杆状病毒中的表达
금류감병독신경안산매기인재중조간상병독중적표체
Expression of avian influenza virus neuraminidase in recombinant baculovirus
  • 万方数据
    畜牧与兽医 축목여수의
    ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
    2012年 5期 16-20 ,共5页

    孙晓东%包红梅%赵玉辉%路冰%孙佳善%文雪霞%熊永忠%陈化兰%王秀荣

    손효동%포홍매%조옥휘%로빙%손가선%문설하%웅영충%진화란%왕수영

    禽流感病毒%神经氨酸酶%重组杆状病毒 禽流感病毒%神經氨痠酶%重組桿狀病毒
    금류감병독%신경안산매%중조간상병독
    根据已知H5N1亚型禽流感病毒(AIV)神经氨酸酶(NA)基因序列设计并合成引物.从H5N1亚型病毒感染的鸡胚尿囊液中提取总RNA,反转录后采用高保真DNA聚合酶扩增NA基因,构建转移载体pFastBacHTA-NA,并与大肠杆菌DH10Bac的Bacmid质粒重组,构建重组转座质粒rBacmid-NA.在脂质体介导下将rBacmid-NA转染sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒.在sf9昆虫细胞中表达NA蛋白,通过SDS-PAGE、Western blot和激光共聚焦检测蛋白.结果表明:表达的NA蛋白分子量约为53 ku,该蛋白能与H5N1亚型AIV血清发生特异性反应,证明NA蛋白表达正确,具有良好的免疫反应性.
    근거이지H5N1아형금류감병독(AIV)신경안산매(NA)기인서렬설계병합성인물.종H5N1아형병독감염적계배뇨낭액중제취총RNA,반전록후채용고보진DNA취합매확증NA기인,구건전이재체pFastBacHTA-NA,병여대장간균DH10Bac적Bacmid질립중조,구건중조전좌질립rBacmid-NA.재지질체개도하장rBacmid-NA전염sf9곤충세포획득중조간상병독.재sf9곤충세포중표체NA단백,통과SDS-PAGE、Western blot화격광공취초검측단백.결과표명:표체적NA단백분자량약위53 ku,해단백능여H5N1아형AIV혈청발생특이성반응,증명NA단백표체정학,구유량호적면역반응성.
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