中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2008年
4期
289-294
,共6页
蒙学莲%景志忠%房永祥%窦永喜%陈国华%贾怀杰%段凤云%才学鹏
矇學蓮%景誌忠%房永祥%竇永喜%陳國華%賈懷傑%段鳳雲%纔學鵬
몽학련%경지충%방영상%두영희%진국화%가부걸%단봉운%재학붕
重组表达质粒%生物安全性%组织分布%基因组整合%转移和扩散
重組錶達質粒%生物安全性%組織分佈%基因組整閤%轉移和擴散
중조표체질립%생물안전성%조직분포%기인조정합%전이화확산
重组表达质粒作为免疫佐剂从实验室走向临床必须解决其对机体和生物环境释放的安全性问题.本研究以pcDNA3.1/IFN-γ重组表达质粒作为免疫佐剂进行试验,探讨了其在小鼠体内组织的分布和生物安全性.将pcDNA3.1/IFN-γ重组表达质粒经肌肉途径免疫小鼠,免疫后不同时间迫杀,并取各种组织抽提基因组DNA:一是利用PCR技术检测其在组织内的分布及与细胞基因组发生整合的可能性;二是以PCR技术检测免疫动物现场环境样品,监测pcDNA3.1/IFN-γ重组表达质粒中的猪IFN-γ基因、CMV启动子基因和抗性基因是否转移和扩散到环境细菌中.结果表明,免疫24 h后在小鼠的各组织中仅注射部位肌肉存在重组表达质粒,免疫5 d后仅有1只小鼠注射部位肌肉和血液中存在重组表达质粒,免疫15 d后所有动物的各组织中无重组表达质粒存在;同时未发现pcDNA3.1/IFN-γ重组表达质粒整合到宿主细胞基因组和转化到环境其他细茵中.因此,认为pcDNA3.1/IFN-γ重组表达质粒对动物和环境是安全的.
重組錶達質粒作為免疫佐劑從實驗室走嚮臨床必鬚解決其對機體和生物環境釋放的安全性問題.本研究以pcDNA3.1/IFN-γ重組錶達質粒作為免疫佐劑進行試驗,探討瞭其在小鼠體內組織的分佈和生物安全性.將pcDNA3.1/IFN-γ重組錶達質粒經肌肉途徑免疫小鼠,免疫後不同時間迫殺,併取各種組織抽提基因組DNA:一是利用PCR技術檢測其在組織內的分佈及與細胞基因組髮生整閤的可能性;二是以PCR技術檢測免疫動物現場環境樣品,鑑測pcDNA3.1/IFN-γ重組錶達質粒中的豬IFN-γ基因、CMV啟動子基因和抗性基因是否轉移和擴散到環境細菌中.結果錶明,免疫24 h後在小鼠的各組織中僅註射部位肌肉存在重組錶達質粒,免疫5 d後僅有1隻小鼠註射部位肌肉和血液中存在重組錶達質粒,免疫15 d後所有動物的各組織中無重組錶達質粒存在;同時未髮現pcDNA3.1/IFN-γ重組錶達質粒整閤到宿主細胞基因組和轉化到環境其他細茵中.因此,認為pcDNA3.1/IFN-γ重組錶達質粒對動物和環境是安全的.
중조표체질립작위면역좌제종실험실주향림상필수해결기대궤체화생물배경석방적안전성문제.본연구이pcDNA3.1/IFN-γ중조표체질립작위면역좌제진행시험,탐토료기재소서체내조직적분포화생물안전성.장pcDNA3.1/IFN-γ중조표체질립경기육도경면역소서,면역후불동시간박살,병취각충조직추제기인조DNA:일시이용PCR기술검측기재조직내적분포급여세포기인조발생정합적가능성;이시이PCR기술검측면역동물현장배경양품,감측pcDNA3.1/IFN-γ중조표체질립중적저IFN-γ기인、CMV계동자기인화항성기인시부전이화확산도배경세균중.결과표명,면역24 h후재소서적각조직중부주사부위기육존재중조표체질립,면역5 d후부유1지소서주사부위기육화혈액중존재중조표체질립,면역15 d후소유동물적각조직중무중조표체질립존재;동시미발현pcDNA3.1/IFN-γ중조표체질립정합도숙주세포기인조화전화도배경기타세인중.인차,인위pcDNA3.1/IFN-γ중조표체질립대동물화배경시안전적.
