CAJ | 학술논문

目的:探讨血管紧张素(Ang)Ⅱ在诱导巨噬细胞表达细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)中的作用及机制.方法:以5 ng/ml佛波醇诱导人类单核细胞株细胞成巨噬细胞后,倒置相差显微镜观察诱导情况;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法监测不同Ang Ⅱ刺激下的细胞活性;逆转录聚合酶链式反应及蛋白质印迹检测不同时间及不同浓度的Ang Ⅱ对EMMPRIN基因及蛋白表达的影响;进一步用Ang Ⅰ受体拮抗剂(10 μM)及Ang Ⅱ受体拮抗剂(10μM)探讨信号传导机制,检测Ang Ⅱ对EMMPRIN的诱导情况.结果:在5 ng/ml佛波醇诱导下可很好的建立巨噬细胞模型.四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法结果示Ang Ⅱ在0.01～10μM浓度下,细胞的活性不受影响(P>0.05),50 μM Ang Ⅱ刺激下细胞活性改变(P<0.05),差异有统计学意义.不同浓度Ang Ⅱ刺激下巨噬细胞内EMMPRIN基因及蛋白的表达成时间依赖性,6 h后开始增高(P<0.05),12 h后达峰值(P<0.01),24 h后开始下降(P<0.05),差异有统计学意义;Ang Ⅱ对EMMPRIN的刺激作用亦呈剂量依赖型,随着浓度(0 μM、0.01μM、0.1μM和1μM)的增加,EMMPRIN基因及蛋白的表达亦明显增加(P<0.05),差异有统计学意义;进一步的信号通路研究实验结果示Ang Ⅰ受体拮抗剂可抑制AngⅡ的诱导作用(P<0.05),AngⅡ受体拈抗剂则无影响.结论:在佛波醇诱导的人类单核细胞株细胞中,Ang Ⅱ通过Ang Ⅰ受体上调巨噬细胞中EMMPRIN的表达,氯沙坦可抑制其上调作用.
목적:탐토혈관긴장소(Ang)Ⅱ재유도거서세포표체세포외기질금속단백매유도인자(EMMPRIN)중적작용급궤제.방법:이5 ng/ml불파순유도인류단핵세포주세포성거서세포후,도치상차현미경관찰유도정황;사갑기우담서염미량매반응비색법감측불동Ang Ⅱ자격하적세포활성;역전록취합매련식반응급단백질인적검측불동시간급불동농도적Ang Ⅱ대EMMPRIN기인급단백표체적영향;진일보용Ang Ⅰ수체길항제(10 μM)급Ang Ⅱ수체길항제(10μM)탐토신호전도궤제,검측Ang Ⅱ대EMMPRIN적유도정황.결과:재5 ng/ml불파순유도하가흔호적건립거서세포모형.사갑기우담서염미량매반응비색법결과시Ang Ⅱ재0.01～10μM농도하,세포적활성불수영향(P>0.05),50 μM Ang Ⅱ자격하세포활성개변(P<0.05),차이유통계학의의.불동농도Ang Ⅱ자격하거서세포내EMMPRIN기인급단백적표체성시간의뢰성,6 h후개시증고(P<0.05),12 h후체봉치(P<0.01),24 h후개시하강(P<0.05),차이유통계학의의;Ang Ⅱ대EMMPRIN적자격작용역정제량의뢰형,수착농도(0 μM、0.01μM、0.1μM화1μM)적증가,EMMPRIN기인급단백적표체역명현증가(P<0.05),차이유통계학의의;진일보적신호통로연구실험결과시Ang Ⅰ수체길항제가억제AngⅡ적유도작용(P<0.05),AngⅡ수체념항제칙무영향.결론:재불파순유도적인류단핵세포주세포중,Ang Ⅱ통과Ang Ⅰ수체상조거서세포중EMMPRIN적표체,록사탄가억제기상조작용.