热带作物学报
熱帶作物學報
열대작물학보
CHINESE JOURNAL OF TROPICAL CROPS
2010年
8期
1293-1297
,共5页
崔艳艳%易国辉%屠发志%张添元%罗进贤%张爱联
崔豔豔%易國輝%屠髮誌%張添元%囉進賢%張愛聯
최염염%역국휘%도발지%장첨원%라진현%장애련
纤维素二糖水解酶%毕赤酵母%基因表达%纤维素酶活力
纖維素二糖水解酶%畢赤酵母%基因錶達%纖維素酶活力
섬유소이당수해매%필적효모%기인표체%섬유소매활력
用PER法扩增里氏木霉cbh Ⅱ基因,并将其克隆到P.pastoris表达载体pGAP9K,获得重组表达质粒pGAPgK-cbhⅡ.通过电转法将cbhⅡ基因整合到P.pastoris的基因组中,然后筛选高G418抗性的克隆作为工程菌菌种.在生物反应器中生产CBHⅡ,将20L发酵液装入50L的发酵罐中,在发酵过程中连续64h补加甘油-PTM4,放罐时生物量为A600=170,CBHⅡ的表达量为75mg/L.其表达产物具有酶解羧甲基纤维素的活性.
用PER法擴增裏氏木黴cbh Ⅱ基因,併將其剋隆到P.pastoris錶達載體pGAP9K,穫得重組錶達質粒pGAPgK-cbhⅡ.通過電轉法將cbhⅡ基因整閤到P.pastoris的基因組中,然後篩選高G418抗性的剋隆作為工程菌菌種.在生物反應器中生產CBHⅡ,將20L髮酵液裝入50L的髮酵罐中,在髮酵過程中連續64h補加甘油-PTM4,放罐時生物量為A600=170,CBHⅡ的錶達量為75mg/L.其錶達產物具有酶解羧甲基纖維素的活性.
용PER법확증리씨목매cbh Ⅱ기인,병장기극륭도P.pastoris표체재체pGAP9K,획득중조표체질립pGAPgK-cbhⅡ.통과전전법장cbhⅡ기인정합도P.pastoris적기인조중,연후사선고G418항성적극륭작위공정균균충.재생물반응기중생산CBHⅡ,장20L발효액장입50L적발효관중,재발효과정중련속64h보가감유-PTM4,방관시생물량위A600=170,CBHⅡ적표체량위75mg/L.기표체산물구유매해최갑기섬유소적활성.
