眼科学报
眼科學報
안과학보
EYE SCIENCE
2010年
2期
99-102
,共4页
林少芬%周焕娇%丁运刚%梁小玲%罗燕%唐仕波
林少芬%週煥嬌%丁運剛%樑小玲%囉燕%唐仕波
림소분%주환교%정운강%량소령%라연%당사파
人脐静脉内皮细胞%细胞培养方法%鉴定
人臍靜脈內皮細胞%細胞培養方法%鑒定
인제정맥내피세포%세포배양방법%감정
目的:建立能大量分离人脐静脉内皮细胞的体外培养的简便方法,分析人脐静脉内皮细胞抗原表达的特点.方法:采用玻璃接管连接医用三通管灌注0.133%胶原酶I法分离脐静脉内皮细胞,培养于10%胎牛血清的人内皮细胞培养液(含β-促内皮细胞生长因子和肝素钠),培养皿用1.5%明胶包被,促进内皮细胞贴壁.培养过程中观察细胞的形态特征,同时行免疫组织化学染色检测第八因子相关抗原、CD31表达情况,鉴定内皮细胞来源.结果:成功获取人脐静脉内皮细胞,原代人脐内皮细胞24 h贴壁,第5日细胞融合;第八因子相关抗原和CD31呈广泛的阳性表达.第八因子相关抗原阳性染色程度高于CD31,证实为人脐静脉内皮细胞.结论:应用玻璃接管连接医用三通管灌注胶原酶消化法分离脐静脉内皮细胞,利用10%优质胎牛血清的人内皮细胞培养基,添加β-促内皮细胞生长因子和肝素钠,并用1.5%明胶包被培养皿,能简单有效培养人脐静脉内皮细胞.
目的:建立能大量分離人臍靜脈內皮細胞的體外培養的簡便方法,分析人臍靜脈內皮細胞抗原錶達的特點.方法:採用玻璃接管連接醫用三通管灌註0.133%膠原酶I法分離臍靜脈內皮細胞,培養于10%胎牛血清的人內皮細胞培養液(含β-促內皮細胞生長因子和肝素鈉),培養皿用1.5%明膠包被,促進內皮細胞貼壁.培養過程中觀察細胞的形態特徵,同時行免疫組織化學染色檢測第八因子相關抗原、CD31錶達情況,鑒定內皮細胞來源.結果:成功穫取人臍靜脈內皮細胞,原代人臍內皮細胞24 h貼壁,第5日細胞融閤;第八因子相關抗原和CD31呈廣汎的暘性錶達.第八因子相關抗原暘性染色程度高于CD31,證實為人臍靜脈內皮細胞.結論:應用玻璃接管連接醫用三通管灌註膠原酶消化法分離臍靜脈內皮細胞,利用10%優質胎牛血清的人內皮細胞培養基,添加β-促內皮細胞生長因子和肝素鈉,併用1.5%明膠包被培養皿,能簡單有效培養人臍靜脈內皮細胞.
목적:건립능대량분리인제정맥내피세포적체외배양적간편방법,분석인제정맥내피세포항원표체적특점.방법:채용파리접관련접의용삼통관관주0.133%효원매I법분리제정맥내피세포,배양우10%태우혈청적인내피세포배양액(함β-촉내피세포생장인자화간소납),배양명용1.5%명효포피,촉진내피세포첩벽.배양과정중관찰세포적형태특정,동시행면역조직화학염색검측제팔인자상관항원、CD31표체정황,감정내피세포래원.결과:성공획취인제정맥내피세포,원대인제내피세포24 h첩벽,제5일세포융합;제팔인자상관항원화CD31정엄범적양성표체.제팔인자상관항원양성염색정도고우CD31,증실위인제정맥내피세포.결론:응용파리접관련접의용삼통관관주효원매소화법분리제정맥내피세포,이용10%우질태우혈청적인내피세포배양기,첨가β-촉내피세포생장인자화간소납,병용1.5%명효포피배양명,능간단유효배양인제정맥내피세포.
