抗基孔肯亚病毒人-鼠嵌合抗体真核表达载体的构建和表达
항기공긍아병독인-서감합항체진핵표체재체적구건화표체
Expression of human-mouse chimeric antibody directed against Chikungunya virus
  • 万方数据
    军事医学科学院院刊 군사의학과학원원간
    BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
    2004年 3期 225-228 ,共4页

    李建民%陈薇%安小平%樊英茹%郝晓萌%李冰%陈万荣%刘树玲%童贻刚

    리건민%진미%안소평%번영여%학효맹%리빙%진만영%류수령%동이강

    基孔肯亚病毒%免疫球蛋白基因%人-鼠嵌合抗体%真核表达%CHO细胞 基孔肯亞病毒%免疫毬蛋白基因%人-鼠嵌閤抗體%真覈錶達%CHO細胞
    기공긍아병독%면역구단백기인%인-서감합항체%진핵표체%CHO세포
    目的:表达具有中和活性的抗基孔肯亚病毒人-鼠嵌合抗体.方法:用RT-PCR法克隆具有中和活性的抗基孔肯亚病毒鼠源单克隆抗体CHIK-IF1的轻重链可变区基因,克隆人IgG1恒定区基因组基因,构建了轻重链嵌合基因和表达质粒pCdhfr1L,pcDNA3.1H,共转染二氢叶酸还原酶缺陷型CHO细胞,用ELISA检测培养上清中嵌合抗体的表达,MTX加压筛选表达量高的克隆,扩大培养收集上清并纯化,纯化的嵌合抗体进行SDS-PAGE、Western 印迹检测和抗原结合活性的检测.结果与结论:在CHO细胞中成功表达了抗基孔肯亚病毒的嵌合抗体,为制备抗基孔肯亚病的被动免疫制剂奠定了良好的基础.
    목적:표체구유중화활성적항기공긍아병독인-서감합항체.방법:용RT-PCR법극륭구유중화활성적항기공긍아병독서원단극륭항체CHIK-IF1적경중련가변구기인,극륭인IgG1항정구기인조기인,구건료경중련감합기인화표체질립pCdhfr1L,pcDNA3.1H,공전염이경협산환원매결함형CHO세포,용ELISA검측배양상청중감합항체적표체,MTX가압사선표체량고적극륭,확대배양수집상청병순화,순화적감합항체진행SDS-PAGE、Western 인적검측화항원결합활성적검측.결과여결론:재CHO세포중성공표체료항기공긍아병독적감합항체,위제비항기공긍아병적피동면역제제전정료량호적기출.
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