西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
5期
59-62
,共4页
苏春霞%苏鑫铭%张彦明%曹瑞兵%周斌%陈溥言
囌春霞%囌鑫銘%張彥明%曹瑞兵%週斌%陳溥言
소춘하%소흠명%장언명%조서병%주빈%진부언
畜禽疫病%新城疫病毒%F基因%马立克氏病病毒CVI988转移质粒载体
畜禽疫病%新城疫病毒%F基因%馬立剋氏病病毒CVI988轉移質粒載體
축금역병%신성역병독%F기인%마립극씨병병독CVI988전이질립재체
为进一步提高重组病毒的表达水平,用构建的含gB启动子和NDV F48E9株F基因的MDVCVI988株转移质粒载体pUS10F转染293 T细胞,通过PCR和接免疫荧光(IFA)法研究了其在真核中的表达,并确定最佳的转染条件.结果表明,真核细胞中带有F基因,转移质粒载体已经进入细胞DNA;转染转移质粒载体pUS10F后的293 T细胞所表达的NDV F基因产物抗原性较好,能够与抗NDV的标准血清反应.确定的最佳转染条件为:DNA 3μg/mL,转染后48 h外源基因在细胞中的表达量最高,在6孔板和96孔板中细胞数量分别以2×105/孔和1×104/孔的转染效果最好.
為進一步提高重組病毒的錶達水平,用構建的含gB啟動子和NDV F48E9株F基因的MDVCVI988株轉移質粒載體pUS10F轉染293 T細胞,通過PCR和接免疫熒光(IFA)法研究瞭其在真覈中的錶達,併確定最佳的轉染條件.結果錶明,真覈細胞中帶有F基因,轉移質粒載體已經進入細胞DNA;轉染轉移質粒載體pUS10F後的293 T細胞所錶達的NDV F基因產物抗原性較好,能夠與抗NDV的標準血清反應.確定的最佳轉染條件為:DNA 3μg/mL,轉染後48 h外源基因在細胞中的錶達量最高,在6孔闆和96孔闆中細胞數量分彆以2×105/孔和1×104/孔的轉染效果最好.
위진일보제고중조병독적표체수평,용구건적함gB계동자화NDV F48E9주F기인적MDVCVI988주전이질립재체pUS10F전염293 T세포,통과PCR화접면역형광(IFA)법연구료기재진핵중적표체,병학정최가적전염조건.결과표명,진핵세포중대유F기인,전이질립재체이경진입세포DNA;전염전이질립재체pUS10F후적293 T세포소표체적NDV F기인산물항원성교호,능구여항NDV적표준혈청반응.학정적최가전염조건위:DNA 3μg/mL,전염후48 h외원기인재세포중적표체량최고,재6공판화96공판중세포수량분별이2×105/공화1×104/공적전염효과최호.
