基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2006年
11期
1191-1195
,共5页
刘志国%张红%吕玲肖%屈伸
劉誌國%張紅%呂玲肖%屈伸
류지국%장홍%려령초%굴신
受体相关蛋白%诱导表达%原核表达
受體相關蛋白%誘導錶達%原覈錶達
수체상관단백%유도표체%원핵표체
目的 研究人源受体相关蛋白(RAP)的表达并鉴定表达产物的功能.方法 用IPTG诱导培养含有人源RAP重组表达载体(pET-28a(+)-RAP)的BL21转化菌,利用融合蛋白中6个组氨酸纯化标签,经Ni+-NTA树脂亲和层析、SDS-PAGE分离鉴定表达产物,并经脱盐、浓缩、冻干处理获得RAP融合蛋白冻干品.将RAP融合蛋白与富含LDLR家族受体的巨噬细胞进行结合实验,分析RAP融合蛋白的功能.结果 经亲和层析分离纯化后获得可溶性表达的RAP融合蛋白.实验显示,表达的RAP融合蛋白可竞争性抑制VLDL与巨噬细胞的结合.结论 实验获得的RAP融合蛋白具有正常的结合活性,可用于相关研究,为RAP蛋白生产开发奠定了良好的基础.
目的 研究人源受體相關蛋白(RAP)的錶達併鑒定錶達產物的功能.方法 用IPTG誘導培養含有人源RAP重組錶達載體(pET-28a(+)-RAP)的BL21轉化菌,利用融閤蛋白中6箇組氨痠純化標籤,經Ni+-NTA樹脂親和層析、SDS-PAGE分離鑒定錶達產物,併經脫鹽、濃縮、凍榦處理穫得RAP融閤蛋白凍榦品.將RAP融閤蛋白與富含LDLR傢族受體的巨噬細胞進行結閤實驗,分析RAP融閤蛋白的功能.結果 經親和層析分離純化後穫得可溶性錶達的RAP融閤蛋白.實驗顯示,錶達的RAP融閤蛋白可競爭性抑製VLDL與巨噬細胞的結閤.結論 實驗穫得的RAP融閤蛋白具有正常的結閤活性,可用于相關研究,為RAP蛋白生產開髮奠定瞭良好的基礎.
목적 연구인원수체상관단백(RAP)적표체병감정표체산물적공능.방법 용IPTG유도배양함유인원RAP중조표체재체(pET-28a(+)-RAP)적BL21전화균,이용융합단백중6개조안산순화표첨,경Ni+-NTA수지친화층석、SDS-PAGE분리감정표체산물,병경탈염、농축、동간처리획득RAP융합단백동간품.장RAP융합단백여부함LDLR가족수체적거서세포진행결합실험,분석RAP융합단백적공능.결과 경친화층석분리순화후획득가용성표체적RAP융합단백.실험현시,표체적RAP융합단백가경쟁성억제VLDL여거서세포적결합.결론 실험획득적RAP융합단백구유정상적결합활성,가용우상관연구,위RAP단백생산개발전정료량호적기출.
