南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2007年
1期
49-51,55
,共4页
代广辉%修俊刚%周振军%陈中灿%徐如祥%姜晓丹%杜谋选
代廣輝%脩俊剛%週振軍%陳中燦%徐如祥%薑曉丹%杜謀選
대엄휘%수준강%주진군%진중찬%서여상%강효단%두모선
骨髓基质细胞%神经干细胞%超顺磁性氧化铁
骨髓基質細胞%神經榦細胞%超順磁性氧化鐵
골수기질세포%신경간세포%초순자성양화철
目的 初步研究利用超顺磁性氧化铁标记大鼠骨髓基质细胞来源的神经干细胞及其对细胞活力、增殖等生物学活性的影响,并确定最佳标记浓度.方法 无菌条件下取大鼠股骨骨髓,梯度密度离心法分离得到骨髓基质细胞.体外培养、诱导成神经干细胞,使用不同终浓度的(6.25、12.5、25、37.5、50μg/ml)Ferumoxides(超顺磁性氧化铁)标记神经干细胞,采用普鲁士蓝染色、MTT法、流式细胞仪、透射电镜等方法鉴定Ferumoxides标记神经干细胞的效率及对细胞活力、增殖等生物学特性的影响.结果 Ferumoxides可以高效率标记神经干细胞,标记效率在90%以上.普鲁士蓝染色显示标记的神经干细胞胞质内存在细小蓝色铁颗粒,细胞呈淡蓝至深蓝色,颜色的深浅与所加Ferumoxides的剂量成正相关.电镜结果显示标记的神经干细胞胞质内含有许多包裹铁颗粒的囊泡,主要集中在胞体上.当Ferumoxides终浓度高于25 μg/ml时,Ferumoxides颗粒在细胞内聚集成团块状,量较多,在一定程度上影响了细胞超微结构的观察;低于25 μg/ml时,Ferumoxides颗粒散布于细胞胞质内,并随着浓度的降低,Ferumoxides颗粒在胞质内分布越分散,量越少.MTT及流式细胞仪结果显示Ferumoxides终浓度大于25 μg/ml时则对细胞活力、增殖、凋亡有一定影响,小于等于25 μg/ml时对细胞活力、增殖无明显影响.结论 利用Ferumoxides在体外标记神经干细胞是一种可行的实验方案,其最佳终浓度为25 μg/ml.
目的 初步研究利用超順磁性氧化鐵標記大鼠骨髓基質細胞來源的神經榦細胞及其對細胞活力、增殖等生物學活性的影響,併確定最佳標記濃度.方法 無菌條件下取大鼠股骨骨髓,梯度密度離心法分離得到骨髓基質細胞.體外培養、誘導成神經榦細胞,使用不同終濃度的(6.25、12.5、25、37.5、50μg/ml)Ferumoxides(超順磁性氧化鐵)標記神經榦細胞,採用普魯士藍染色、MTT法、流式細胞儀、透射電鏡等方法鑒定Ferumoxides標記神經榦細胞的效率及對細胞活力、增殖等生物學特性的影響.結果 Ferumoxides可以高效率標記神經榦細胞,標記效率在90%以上.普魯士藍染色顯示標記的神經榦細胞胞質內存在細小藍色鐵顆粒,細胞呈淡藍至深藍色,顏色的深淺與所加Ferumoxides的劑量成正相關.電鏡結果顯示標記的神經榦細胞胞質內含有許多包裹鐵顆粒的囊泡,主要集中在胞體上.噹Ferumoxides終濃度高于25 μg/ml時,Ferumoxides顆粒在細胞內聚集成糰塊狀,量較多,在一定程度上影響瞭細胞超微結構的觀察;低于25 μg/ml時,Ferumoxides顆粒散佈于細胞胞質內,併隨著濃度的降低,Ferumoxides顆粒在胞質內分佈越分散,量越少.MTT及流式細胞儀結果顯示Ferumoxides終濃度大于25 μg/ml時則對細胞活力、增殖、凋亡有一定影響,小于等于25 μg/ml時對細胞活力、增殖無明顯影響.結論 利用Ferumoxides在體外標記神經榦細胞是一種可行的實驗方案,其最佳終濃度為25 μg/ml.
목적 초보연구이용초순자성양화철표기대서골수기질세포래원적신경간세포급기대세포활력、증식등생물학활성적영향,병학정최가표기농도.방법 무균조건하취대서고골골수,제도밀도리심법분리득도골수기질세포.체외배양、유도성신경간세포,사용불동종농도적(6.25、12.5、25、37.5、50μg/ml)Ferumoxides(초순자성양화철)표기신경간세포,채용보로사람염색、MTT법、류식세포의、투사전경등방법감정Ferumoxides표기신경간세포적효솔급대세포활력、증식등생물학특성적영향.결과 Ferumoxides가이고효솔표기신경간세포,표기효솔재90%이상.보로사람염색현시표기적신경간세포포질내존재세소람색철과립,세포정담람지심람색,안색적심천여소가Ferumoxides적제량성정상관.전경결과현시표기적신경간세포포질내함유허다포과철과립적낭포,주요집중재포체상.당Ferumoxides종농도고우25 μg/ml시,Ferumoxides과립재세포내취집성단괴상,량교다,재일정정도상영향료세포초미결구적관찰;저우25 μg/ml시,Ferumoxides과립산포우세포포질내,병수착농도적강저,Ferumoxides과립재포질내분포월분산,량월소.MTT급류식세포의결과현시Ferumoxides종농도대우25 μg/ml시칙대세포활력、증식、조망유일정영향,소우등우25 μg/ml시대세포활력、증식무명현영향.결론 이용Ferumoxides재체외표기신경간세포시일충가행적실험방안,기최가종농도위25 μg/ml.
