中国动物检疫
中國動物檢疫
중국동물검역
CHINA ANMAL QUARANTINE
2008年
12期
28-30
,共3页
赵文姬%包静月%李林%王志亮
趙文姬%包靜月%李林%王誌亮
조문희%포정월%리림%왕지량
小反刍兽疫病毒%体外转录%实时定量RT-PCR
小反芻獸疫病毒%體外轉錄%實時定量RT-PCR
소반추수역병독%체외전록%실시정량RT-PCR
针对小反刍兽疫病毒的F基因设计了一对荧光定量RT-PCR的引物和探针,在正向引物的5'端加上T7启动子后与反向引物扩增小反刍兽疫病毒株Nigeria 75/1细胞培养液RNA,切胶回收目的条带作为体外转录模板,体外转录后测RNA浓度以及OD值.线性试验和特异性试验结果表明,该模板具有良好的线性范围和特异性,当稀释度为4.9×1084.9×103拷贝/μL时,相关系数为0.999.该模板稳定性好,-80℃保存一个月后无显著变化.对起始浓度为4.9×106、4.9×105、4.9×104拷贝/μl的标准品分别检测10次,变异系数分别为1.09%,1.47%,1.34%,表明以此模板进行荧光定量PCR具有较好的重复性.
針對小反芻獸疫病毒的F基因設計瞭一對熒光定量RT-PCR的引物和探針,在正嚮引物的5'耑加上T7啟動子後與反嚮引物擴增小反芻獸疫病毒株Nigeria 75/1細胞培養液RNA,切膠迴收目的條帶作為體外轉錄模闆,體外轉錄後測RNA濃度以及OD值.線性試驗和特異性試驗結果錶明,該模闆具有良好的線性範圍和特異性,噹稀釋度為4.9×1084.9×103拷貝/μL時,相關繫數為0.999.該模闆穩定性好,-80℃保存一箇月後無顯著變化.對起始濃度為4.9×106、4.9×105、4.9×104拷貝/μl的標準品分彆檢測10次,變異繫數分彆為1.09%,1.47%,1.34%,錶明以此模闆進行熒光定量PCR具有較好的重複性.
침대소반추수역병독적F기인설계료일대형광정량RT-PCR적인물화탐침,재정향인물적5'단가상T7계동자후여반향인물확증소반추수역병독주Nigeria 75/1세포배양액RNA,절효회수목적조대작위체외전록모판,체외전록후측RNA농도이급OD치.선성시험화특이성시험결과표명,해모판구유량호적선성범위화특이성,당희석도위4.9×1084.9×103고패/μL시,상관계수위0.999.해모판은정성호,-80℃보존일개월후무현저변화.대기시농도위4.9×106、4.9×105、4.9×104고패/μl적표준품분별검측10차,변이계수분별위1.09%,1.47%,1.34%,표명이차모판진행형광정량PCR구유교호적중복성.
