华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2009年
3期
313-316
,共4页
徐亮%郭君红%郭向飞%刘冠军%杨述华
徐亮%郭君紅%郭嚮飛%劉冠軍%楊述華
서량%곽군홍%곽향비%류관군%양술화
RECK基因%转染%骨肉瘤%基质金属蛋白酶
RECK基因%轉染%骨肉瘤%基質金屬蛋白酶
RECK기인%전염%골육류%기질금속단백매
目的 观察转染RECK基因对人骨肉瘤细胞MG-63的MMP-2活化及细胞侵袭力的影响.方法 以脂质体LipofectamineTM2000介导的方法将含RECK全长基因的真核重组表达质粒pcDNA3-RECK转染入MG-63细胞,RT-PCR、流式细胞术检测目的 基因的表达,明胶酶谱法、Matrigel侵袭实验分别检测MG-63细胞MMP-2活化比例及细胞侵袭力变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和细胞生长曲线法观察转染质粒DNA对细胞的毒性作用.结果 转染后RECK基因在MG-63细胞Mrna和蛋白水平分别有稳定高表达;明胶酶谱显示重组质粒转染组MMP一2的活化比例均明显低于正常对照组、空载质粒转染组(均P<0.01),Matrigel侵袭实验显示重组质粒转染组穿透Matrigel的细胞数目均明显低于正常对照组、空载质粒转染组(均P<0.05);而MTT法测重组质粒转染组细胞生长曲线与正常对照组、空载质粒转染组无明显差异(均P>0.05).结论 RECK基因过表达可显著减少骨肉瘤细胞MG-63的MMP-2活化及其侵袭能力,RECK基因可能成为肿瘤治疗的新靶点.
目的 觀察轉染RECK基因對人骨肉瘤細胞MG-63的MMP-2活化及細胞侵襲力的影響.方法 以脂質體LipofectamineTM2000介導的方法將含RECK全長基因的真覈重組錶達質粒pcDNA3-RECK轉染入MG-63細胞,RT-PCR、流式細胞術檢測目的 基因的錶達,明膠酶譜法、Matrigel侵襲實驗分彆檢測MG-63細胞MMP-2活化比例及細胞侵襲力變化;四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法和細胞生長麯線法觀察轉染質粒DNA對細胞的毒性作用.結果 轉染後RECK基因在MG-63細胞Mrna和蛋白水平分彆有穩定高錶達;明膠酶譜顯示重組質粒轉染組MMP一2的活化比例均明顯低于正常對照組、空載質粒轉染組(均P<0.01),Matrigel侵襲實驗顯示重組質粒轉染組穿透Matrigel的細胞數目均明顯低于正常對照組、空載質粒轉染組(均P<0.05);而MTT法測重組質粒轉染組細胞生長麯線與正常對照組、空載質粒轉染組無明顯差異(均P>0.05).結論 RECK基因過錶達可顯著減少骨肉瘤細胞MG-63的MMP-2活化及其侵襲能力,RECK基因可能成為腫瘤治療的新靶點.
목적 관찰전염RECK기인대인골육류세포MG-63적MMP-2활화급세포침습력적영향.방법 이지질체LipofectamineTM2000개도적방법장함RECK전장기인적진핵중조표체질립pcDNA3-RECK전염입MG-63세포,RT-PCR、류식세포술검측목적 기인적표체,명효매보법、Matrigel침습실험분별검측MG-63세포MMP-2활화비례급세포침습력변화;사갑기우담서람(MTT)비색법화세포생장곡선법관찰전염질립DNA대세포적독성작용.결과 전염후RECK기인재MG-63세포Mrna화단백수평분별유은정고표체;명효매보현시중조질립전염조MMP일2적활화비례균명현저우정상대조조、공재질립전염조(균P<0.01),Matrigel침습실험현시중조질립전염조천투Matrigel적세포수목균명현저우정상대조조、공재질립전염조(균P<0.05);이MTT법측중조질립전염조세포생장곡선여정상대조조、공재질립전염조무명현차이(균P>0.05).결론 RECK기인과표체가현저감소골육류세포MG-63적MMP-2활화급기침습능력,RECK기인가능성위종류치료적신파점.
