江苏大学学报（医学版）
江囌大學學報（醫學版）
강소대학학보（의학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2010年
3期
207-211
,共5页
杨靖%许文林%李娟%弓晋灵%吴晓君%陈巧云%王法春
楊靖%許文林%李娟%弓晉靈%吳曉君%陳巧雲%王法春
양정%허문림%리연%궁진령%오효군%진교운%왕법춘
Y-盒结合蛋白-1%MCF-7%shRNA%迁移和侵袭能力%MMP-2
Y-盒結閤蛋白-1%MCF-7%shRNA%遷移和侵襲能力%MMP-2
Y-합결합단백-1%MCF-7%shRNA%천이화침습능력%MMP-2
目的:观察Y-盒结合蛋白-1(YB-1)对肿瘤细胞迁移和侵袭能力的影响.方法:通过脂质体介导的方法将YB-1 shRNA重组载体转染入人类乳腺癌MCF-7细胞,经G418筛选及克隆化培养后获得稳定转染株.运用RT-PCR和蛋白质印迹方法检测MCF-7细胞中YB-1 mRNA和YB-1蛋白的表达水平,运用划痕实验和Transwell小室法检测细胞运动、迁移和侵袭能力的变化,同时运用RT-PCR和蛋白质印迹方法检测细胞中MMP-2的表达水平,并用明胶酶谱法检测MMP-2蛋白的活性.结果:稳定转染YB-1 shRNA的细胞中YB-1的表达明显低于转染随机片段的细胞和未转染组细胞,且细胞的运动、迁移和侵袭能力以及MMP-2的表达及活性也较后两组细胞明显下降.转染随机片段的细胞和未转染组细胞间无明显差异.结论:YB-1 shRNA可以沉默乳腺癌MCF-7细胞中YB-1的表达,并降低细胞的迁移和侵袭能力以及MMP-2的表达及活性.
目的:觀察Y-盒結閤蛋白-1(YB-1)對腫瘤細胞遷移和侵襲能力的影響.方法:通過脂質體介導的方法將YB-1 shRNA重組載體轉染入人類乳腺癌MCF-7細胞,經G418篩選及剋隆化培養後穫得穩定轉染株.運用RT-PCR和蛋白質印跡方法檢測MCF-7細胞中YB-1 mRNA和YB-1蛋白的錶達水平,運用劃痕實驗和Transwell小室法檢測細胞運動、遷移和侵襲能力的變化,同時運用RT-PCR和蛋白質印跡方法檢測細胞中MMP-2的錶達水平,併用明膠酶譜法檢測MMP-2蛋白的活性.結果:穩定轉染YB-1 shRNA的細胞中YB-1的錶達明顯低于轉染隨機片段的細胞和未轉染組細胞,且細胞的運動、遷移和侵襲能力以及MMP-2的錶達及活性也較後兩組細胞明顯下降.轉染隨機片段的細胞和未轉染組細胞間無明顯差異.結論:YB-1 shRNA可以沉默乳腺癌MCF-7細胞中YB-1的錶達,併降低細胞的遷移和侵襲能力以及MMP-2的錶達及活性.
목적:관찰Y-합결합단백-1(YB-1)대종류세포천이화침습능력적영향.방법:통과지질체개도적방법장YB-1 shRNA중조재체전염입인류유선암MCF-7세포,경G418사선급극륭화배양후획득은정전염주.운용RT-PCR화단백질인적방법검측MCF-7세포중YB-1 mRNA화YB-1단백적표체수평,운용화흔실험화Transwell소실법검측세포운동、천이화침습능력적변화,동시운용RT-PCR화단백질인적방법검측세포중MMP-2적표체수평,병용명효매보법검측MMP-2단백적활성.결과:은정전염YB-1 shRNA적세포중YB-1적표체명현저우전염수궤편단적세포화미전염조세포,차세포적운동、천이화침습능력이급MMP-2적표체급활성야교후량조세포명현하강.전염수궤편단적세포화미전염조세포간무명현차이.결론:YB-1 shRNA가이침묵유선암MCF-7세포중YB-1적표체,병강저세포적천이화침습능력이급MMP-2적표체급활성.
