康氏木霉纤维素酶CBHI基因克隆及在毕赤酵母中的表达研究
강씨목매섬유소매CBHI기인극륭급재필적효모중적표체연구
Study on the Cloning of Trichoderma koningii Cellulase CBHI & Its Expression in Pichia Pastoris
  • 万方数据
    酿酒科技 양주과기
    LIQUOR-MAKING SCIENCE & TECHNOLOGY
    2011年 1期 24-27 ,共4页

    黄时海%李湘萍%康超%黄飞%汪晟%吴孔阳%曹喜秀%曹普美%何鑫平%梁智群

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    미생물%강씨목매%필적효모%cbhI기인%표체
    在毕赤酵母中表达康氏木霉(Trichoderma Koningii)纤维素酶基因cbhI.提取经诱导的康氏木霉mRNA,通过反转录及PCR反应扩增纤维素酶cbhI基因cDNA.将cbhI基因克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA上,采用电激法将经Sac I线性化的重组质粒pPICZαA-cbhI转化毕赤酵母GS115,MD及G418抗性平板筛选cbhI基因高拷贝转化子,并用PCR鉴定转化子.BMMY培养基中加入0.5%甲醇对毕赤酵母进行纤维素酶CBHI诱导表达.SDS-PAGE电泳结果显示,表达的重组蛋白相对分子质量约67 kD,pNPC酶活为24.1 U/L,酶蛋白量为0.22 mg/mL,表明,康氏木霉cbhI可以在毕赤酵母中表达,并具有较高活性.
    재필적효모중표체강씨목매(Trichoderma Koningii)섬유소매기인cbhI.제취경유도적강씨목매mRNA,통과반전록급PCR반응확증섬유소매cbhI기인cDNA.장cbhI기인극륭도필적효모표체재체pPICZαA상,채용전격법장경Sac I선성화적중조질립pPICZαA-cbhI전화필적효모GS115,MD급G418항성평판사선cbhI기인고고패전화자,병용PCR감정전화자.BMMY배양기중가입0.5%갑순대필적효모진행섬유소매CBHI유도표체.SDS-PAGE전영결과현시,표체적중조단백상대분자질량약67 kD,pNPC매활위24.1 U/L,매단백량위0.22 mg/mL,표명,강씨목매cbhI가이재필적효모중표체,병구유교고활성.
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