水生生物学报
水生生物學報
수생생물학보
ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA
2011年
5期
790-795
,共6页
曾伟伟%王庆%刘永奎%张乐生%刘宝芹%石存斌%吴淑勤
曾偉偉%王慶%劉永奎%張樂生%劉寶芹%石存斌%吳淑勤
증위위%왕경%류영규%장악생%류보근%석존빈%오숙근
草鱼呼肠孤病毒%分离%鉴定%序列分析%免疫原性
草魚呼腸孤病毒%分離%鑒定%序列分析%免疫原性
초어호장고병독%분리%감정%서렬분석%면역원성
从江西南昌患出血病草鱼体内分离出的草鱼病毒(暂命名为JX09-01)能使草鱼肾脏细胞(CIK)、草鱼肝细胞(L8824)、草鱼吻端成纤维细胞(PSF)产生明显的细胞病变效应(CPE).感染CIK细胞固定后经电镜观察,发现细胞质内有大量病毒聚集,形态和排列方式与已报道的草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)相似.针对GCRV 873株S6基因设计的简并引物可以从病料组织和感染细胞中扩增出目的条带,而针对GCRVHZ08株S6基因设计特异性引物未能扩增出目的条带.对JX09-01株的S6全基因进行序列分析表明,其核苷酸序列同GCRV 873株和HZ08株的同源性分别是99.3%和30.4%,推导出的氨基酸序列同源性分别是98.6%和30%,说明草鱼病毒JX09-01株为草鱼呼肠孤病毒.用JX09-0l株接种当年8-10 cm左右的草鱼,没有明显的临床症状,不能致草鱼死亡.用传代至15代的CIK细胞病毒液进行免疫保护试验,结果显示其对强毒株的免疫保护率达到86.7%.实验结果初步显示,新分离到的JX09-01为草鱼呼肠孤病毒弱毒株,可作为弱毒疫苗的候选毒株.
從江西南昌患齣血病草魚體內分離齣的草魚病毒(暫命名為JX09-01)能使草魚腎髒細胞(CIK)、草魚肝細胞(L8824)、草魚吻耑成纖維細胞(PSF)產生明顯的細胞病變效應(CPE).感染CIK細胞固定後經電鏡觀察,髮現細胞質內有大量病毒聚集,形態和排列方式與已報道的草魚呼腸孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)相似.針對GCRV 873株S6基因設計的簡併引物可以從病料組織和感染細胞中擴增齣目的條帶,而針對GCRVHZ08株S6基因設計特異性引物未能擴增齣目的條帶.對JX09-01株的S6全基因進行序列分析錶明,其覈苷痠序列同GCRV 873株和HZ08株的同源性分彆是99.3%和30.4%,推導齣的氨基痠序列同源性分彆是98.6%和30%,說明草魚病毒JX09-01株為草魚呼腸孤病毒.用JX09-0l株接種噹年8-10 cm左右的草魚,沒有明顯的臨床癥狀,不能緻草魚死亡.用傳代至15代的CIK細胞病毒液進行免疫保護試驗,結果顯示其對彊毒株的免疫保護率達到86.7%.實驗結果初步顯示,新分離到的JX09-01為草魚呼腸孤病毒弱毒株,可作為弱毒疫苗的候選毒株.
종강서남창환출혈병초어체내분리출적초어병독(잠명명위JX09-01)능사초어신장세포(CIK)、초어간세포(L8824)、초어문단성섬유세포(PSF)산생명현적세포병변효응(CPE).감염CIK세포고정후경전경관찰,발현세포질내유대량병독취집,형태화배렬방식여이보도적초어호장고병독(Grass carp reovirus,GCRV)상사.침대GCRV 873주S6기인설계적간병인물가이종병료조직화감염세포중확증출목적조대,이침대GCRVHZ08주S6기인설계특이성인물미능확증출목적조대.대JX09-01주적S6전기인진행서렬분석표명,기핵감산서렬동GCRV 873주화HZ08주적동원성분별시99.3%화30.4%,추도출적안기산서렬동원성분별시98.6%화30%,설명초어병독JX09-01주위초어호장고병독.용JX09-0l주접충당년8-10 cm좌우적초어,몰유명현적림상증상,불능치초어사망.용전대지15대적CIK세포병독액진행면역보호시험,결과현시기대강독주적면역보호솔체도86.7%.실험결과초보현시,신분리도적JX09-01위초어호장고병독약독주,가작위약독역묘적후선독주.
