安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
14期
8099-8101
,共3页
郝贵增%付亮%张福良%李敬玺
郝貴增%付亮%張福良%李敬璽
학귀증%부량%장복량%리경새
猪繁殖与呼吸综合征病毒%荧光定量PCR%Taqman探针
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%熒光定量PCR%Taqman探針
저번식여호흡종합정병독%형광정량PCR%Taqman탐침
通过条件优化,以定量的10倍系列稀释的质粒pMD-ORF7为标准品,进行荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了PRRSV的荧光定量RT-PCR检测方法.结果表明,该方法检测灵敏度可达1.0×100拷贝/μl;利用该方法对3份不同的组织样品进行重复性检测,计算出平均循环阈值的标准差分别为0.14、0.14和0.44,变异系数分别为0.01%、0.01%和0.02%,说明该方法具有良好的重复性和重现性.对阳性组织病料的检测表明,该方法与常规RT-PCR的阳性符合率为100%,但其检测灵敏度较常规RT-PCR约高100倍.
通過條件優化,以定量的10倍繫列稀釋的質粒pMD-ORF7為標準品,進行熒光定量PCR擴增併製作標準麯線,建立瞭PRRSV的熒光定量RT-PCR檢測方法.結果錶明,該方法檢測靈敏度可達1.0×100拷貝/μl;利用該方法對3份不同的組織樣品進行重複性檢測,計算齣平均循環閾值的標準差分彆為0.14、0.14和0.44,變異繫數分彆為0.01%、0.01%和0.02%,說明該方法具有良好的重複性和重現性.對暘性組織病料的檢測錶明,該方法與常規RT-PCR的暘性符閤率為100%,但其檢測靈敏度較常規RT-PCR約高100倍.
통과조건우화,이정량적10배계렬희석적질립pMD-ORF7위표준품,진행형광정량PCR확증병제작표준곡선,건립료PRRSV적형광정량RT-PCR검측방법.결과표명,해방법검측령민도가체1.0×100고패/μl;이용해방법대3빈불동적조직양품진행중복성검측,계산출평균순배역치적표준차분별위0.14、0.14화0.44,변이계수분별위0.01%、0.01%화0.02%,설명해방법구유량호적중복성화중현성.대양성조직병료적검측표명,해방법여상규RT-PCR적양성부합솔위100%,단기검측령민도교상규RT-PCR약고100배.