中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2007年
6期
549-554
,共6页
张振华%田拥军%李磊%Melanie Fiedle%Ernst Schmid%Michael Roggendorf%陆蒙吉%徐飏%杨东亮
張振華%田擁軍%李磊%Melanie Fiedle%Ernst Schmid%Michael Roggendorf%陸矇吉%徐飏%楊東亮
장진화%전옹군%리뢰%Melanie Fiedle%Ernst Schmid%Michael Roggendorf%륙몽길%서양%양동량
土拨鼠肝炎病毒%核心蛋白%单克隆抗体%B细胞线性表位
土撥鼠肝炎病毒%覈心蛋白%單剋隆抗體%B細胞線性錶位
토발서간염병독%핵심단백%단극륭항체%B세포선성표위
目的 建立高效表达土拨鼠肝炎病毒核心蛋白(WHcAg)的方法并对其B细胞表位进行鉴定.方法 分别构建不同截短型WHcAg的质粒以了解能大量表达并形成WHV核心颗粒的区段,利用变性WHcAg制备单克隆抗体以寻找能与WHcAg线性B细胞表位结合的单克隆抗体.结果 WHcAg前144或149氨基酸残基能够大量表达并能形成颗粒样结构.这2种截短型WHcAg能够在大肠杆菌中表达并组装成直径为34 nm的核心颗粒,最终纯化获得毫克级的核心蛋白.截短型WHcAg保留了全长WHcAg的抗原性,而且变性WHcAg存在另外的B细胞线性表位,利用变性WHcAg进行免疫制备单克隆抗体获得的5株抗体均针对WHcAg的N末端表位,该表位在WHcAg和HBcAg高度保守.结论 建立了高效表达WHcAg的方法,制备了针对WHcAg单克隆抗体.并对WHcAg的线性B细胞表位进行了鉴定,发现WHcAg和HBcAg的N末端存在共同的线性B细胞表位.
目的 建立高效錶達土撥鼠肝炎病毒覈心蛋白(WHcAg)的方法併對其B細胞錶位進行鑒定.方法 分彆構建不同截短型WHcAg的質粒以瞭解能大量錶達併形成WHV覈心顆粒的區段,利用變性WHcAg製備單剋隆抗體以尋找能與WHcAg線性B細胞錶位結閤的單剋隆抗體.結果 WHcAg前144或149氨基痠殘基能夠大量錶達併能形成顆粒樣結構.這2種截短型WHcAg能夠在大腸桿菌中錶達併組裝成直徑為34 nm的覈心顆粒,最終純化穫得毫剋級的覈心蛋白.截短型WHcAg保留瞭全長WHcAg的抗原性,而且變性WHcAg存在另外的B細胞線性錶位,利用變性WHcAg進行免疫製備單剋隆抗體穫得的5株抗體均針對WHcAg的N末耑錶位,該錶位在WHcAg和HBcAg高度保守.結論 建立瞭高效錶達WHcAg的方法,製備瞭針對WHcAg單剋隆抗體.併對WHcAg的線性B細胞錶位進行瞭鑒定,髮現WHcAg和HBcAg的N末耑存在共同的線性B細胞錶位.
목적 건립고효표체토발서간염병독핵심단백(WHcAg)적방법병대기B세포표위진행감정.방법 분별구건불동절단형WHcAg적질립이료해능대량표체병형성WHV핵심과립적구단,이용변성WHcAg제비단극륭항체이심조능여WHcAg선성B세포표위결합적단극륭항체.결과 WHcAg전144혹149안기산잔기능구대량표체병능형성과립양결구.저2충절단형WHcAg능구재대장간균중표체병조장성직경위34 nm적핵심과립,최종순화획득호극급적핵심단백.절단형WHcAg보류료전장WHcAg적항원성,이차변성WHcAg존재령외적B세포선성표위,이용변성WHcAg진행면역제비단극륭항체획득적5주항체균침대WHcAg적N말단표위,해표위재WHcAg화HBcAg고도보수.결론 건립료고효표체WHcAg적방법,제비료침대WHcAg단극륭항체.병대WHcAg적선성B세포표위진행료감정,발현WHcAg화HBcAg적N말단존재공동적선성B세포표위.
