中南大学学报（医学版）
中南大學學報（醫學版）
중남대학학보（의학판）
JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)
2005年
4期
384-389
,共6页
涂自智%王慷慨%邹江%刘可%邓恭华%肖献忠
塗自智%王慷慨%鄒江%劉可%鄧恭華%肖獻忠
도자지%왕강개%추강%류가%산공화%초헌충
氧化应激%热休克反应%核仁%C2C12肌原细胞%热休克蛋白70
氧化應激%熱休剋反應%覈仁%C2C12肌原細胞%熱休剋蛋白70
양화응격%열휴극반응%핵인%C2C12기원세포%열휴극단백70
目的:探讨氧化应激对热休克蛋白70(heat shock protein 70, HSP70)核仁分布的影响.方法:采用热休克反应(42 ℃ 1 h,37 ℃恢复12 h)诱导C2C12细胞中HSP70的高表达;构建HSP70与增强绿色荧光蛋白(EGFP)的重组质粒.将重组质粒瞬时转染C2C12肌原细胞后,用免疫印迹技术分别检测热休克反应及基因转染诱导的HSP70表达;在分离纯化核仁和胞质蛋白组分后,分别采用免疫细胞化学、荧光技术及免疫印迹检测氧化应激(0.5 mmol/L H2O2)诱导的HSP70的分布改变.结果:免疫印迹显示,热休克反应和瞬时转染重组质粒,均能导致C2C12细胞中HSP70的高表达;荧光示踪显示,过氧化氢处理1 h后,可见胞核有较强的荧光;免疫细胞化学及细胞组分蛋白质免疫印迹显示,热休克处理的细胞暴露于过氧化氢1 h后,HSP70从细胞质向细胞核及核仁移位.结论: 氧化应激能导致HSP70从胞质向核仁移位.
目的:探討氧化應激對熱休剋蛋白70(heat shock protein 70, HSP70)覈仁分佈的影響.方法:採用熱休剋反應(42 ℃ 1 h,37 ℃恢複12 h)誘導C2C12細胞中HSP70的高錶達;構建HSP70與增彊綠色熒光蛋白(EGFP)的重組質粒.將重組質粒瞬時轉染C2C12肌原細胞後,用免疫印跡技術分彆檢測熱休剋反應及基因轉染誘導的HSP70錶達;在分離純化覈仁和胞質蛋白組分後,分彆採用免疫細胞化學、熒光技術及免疫印跡檢測氧化應激(0.5 mmol/L H2O2)誘導的HSP70的分佈改變.結果:免疫印跡顯示,熱休剋反應和瞬時轉染重組質粒,均能導緻C2C12細胞中HSP70的高錶達;熒光示蹤顯示,過氧化氫處理1 h後,可見胞覈有較彊的熒光;免疫細胞化學及細胞組分蛋白質免疫印跡顯示,熱休剋處理的細胞暴露于過氧化氫1 h後,HSP70從細胞質嚮細胞覈及覈仁移位.結論: 氧化應激能導緻HSP70從胞質嚮覈仁移位.
목적:탐토양화응격대열휴극단백70(heat shock protein 70, HSP70)핵인분포적영향.방법:채용열휴극반응(42 ℃ 1 h,37 ℃회복12 h)유도C2C12세포중HSP70적고표체;구건HSP70여증강록색형광단백(EGFP)적중조질립.장중조질립순시전염C2C12기원세포후,용면역인적기술분별검측열휴극반응급기인전염유도적HSP70표체;재분리순화핵인화포질단백조분후,분별채용면역세포화학、형광기술급면역인적검측양화응격(0.5 mmol/L H2O2)유도적HSP70적분포개변.결과:면역인적현시,열휴극반응화순시전염중조질립,균능도치C2C12세포중HSP70적고표체;형광시종현시,과양화경처리1 h후,가견포핵유교강적형광;면역세포화학급세포조분단백질면역인적현시,열휴극처리적세포폭로우과양화경1 h후,HSP70종세포질향세포핵급핵인이위.결론: 양화응격능도치HSP70종포질향핵인이위.
