厦门大学学报(自然科学版)
廈門大學學報(自然科學版)
하문대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2008年
2期
235-239
,共5页
乔永萍%任磊%王林%王祖勇%张其清
喬永萍%任磊%王林%王祖勇%張其清
교영평%임뢰%왕림%왕조용%장기청
Tat多肽%骨髓间充质干细胞%穿膜机制
Tat多肽%骨髓間充質榦細胞%穿膜機製
Tat다태%골수간충질간세포%천막궤제
艾滋病病毒的一个富含精氨酸的Tat多肽具有穿膜转导蛋白功能并能介导多种外源性物质进入细胞甚至细胞核.本研究的目的是探讨Tat多肽进入骨髓间充质干细胞的机制.将FITC标记的Tat分别和Alexa Fluor 546-标记的转铁蛋白(笼形蛋白介导的受体内吞方式入胞)、Alexa Fluor 594-标记的霍乱毒素B(脂筏介导的巨胞饮内化方式入胞)同兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)共孵育.用激光共聚焦扫描显微镜可观察到在BMSCs中穿膜肽Tat和霍乱毒素B呈点状叠加而与转铁蛋白几乎无叠加,同时在细胞核部位观察到有绿色荧光的Tat,初步表明穿膜肽Tat以脂筏介导的内化方式进入BMSCs而非受体介导的内吞方式.另外,低温(4℃),破坏ATP、β-环式糊精和诺考达唑内吞抑制剂的使用均可观察到BMSCs内吞Tat的量降低,也间接验证Tat以脂筏介导的内化方式进入BMSCs.
艾滋病病毒的一箇富含精氨痠的Tat多肽具有穿膜轉導蛋白功能併能介導多種外源性物質進入細胞甚至細胞覈.本研究的目的是探討Tat多肽進入骨髓間充質榦細胞的機製.將FITC標記的Tat分彆和Alexa Fluor 546-標記的轉鐵蛋白(籠形蛋白介導的受體內吞方式入胞)、Alexa Fluor 594-標記的霍亂毒素B(脂筏介導的巨胞飲內化方式入胞)同兔骨髓間充質榦細胞(BMSCs)共孵育.用激光共聚焦掃描顯微鏡可觀察到在BMSCs中穿膜肽Tat和霍亂毒素B呈點狀疊加而與轉鐵蛋白幾乎無疊加,同時在細胞覈部位觀察到有綠色熒光的Tat,初步錶明穿膜肽Tat以脂筏介導的內化方式進入BMSCs而非受體介導的內吞方式.另外,低溫(4℃),破壞ATP、β-環式糊精和諾攷達唑內吞抑製劑的使用均可觀察到BMSCs內吞Tat的量降低,也間接驗證Tat以脂筏介導的內化方式進入BMSCs.
애자병병독적일개부함정안산적Tat다태구유천막전도단백공능병능개도다충외원성물질진입세포심지세포핵.본연구적목적시탐토Tat다태진입골수간충질간세포적궤제.장FITC표기적Tat분별화Alexa Fluor 546-표기적전철단백(롱형단백개도적수체내탄방식입포)、Alexa Fluor 594-표기적곽란독소B(지벌개도적거포음내화방식입포)동토골수간충질간세포(BMSCs)공부육.용격광공취초소묘현미경가관찰도재BMSCs중천막태Tat화곽란독소B정점상첩가이여전철단백궤호무첩가,동시재세포핵부위관찰도유록색형광적Tat,초보표명천막태Tat이지벌개도적내화방식진입BMSCs이비수체개도적내탄방식.령외,저온(4℃),파배ATP、β-배식호정화낙고체서내탄억제제적사용균가관찰도BMSCs내탄Tat적량강저,야간접험증Tat이지벌개도적내화방식진입BMSCs.