植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2008年
1期
24-30
,共7页
刘红光%王中康%曹月青%夏玉先%殷幼平
劉紅光%王中康%曹月青%夏玉先%慇幼平
류홍광%왕중강%조월청%하옥선%은유평
柑桔衰退病毒%内参照%常规RT-PCR%荧光定量RT-PCR%检测
柑桔衰退病毒%內參照%常規RT-PCR%熒光定量RT-PCR%檢測
감길쇠퇴병독%내삼조%상규RT-PCR%형광정량RT-PCR%검측
根据柑桔衰退病毒(CTV)P20基因序列设计cquctv9/cquctv10特异引物对,以柑桔RNA polymeraseⅡ基因作为内参照,建立了柑桔衰退病的常规RT-PCR快速检测体系;依据柑桔衰退病毒P20基因序列设计cquctv1/cquctv2特异引物对和TaqMan探针cquctvp1,建立了柑桔衰退病荧光定量RT-PCR快速检测体系.常规RT-PCR检测下限是含有CTV的50pg总RNA,荧光定量RT-PCR法的检测下限是2 fg纯CTV片段.荧光定量RT-PCR的灵敏度相对比常规RT-PCR高100倍.利用常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR体系对从2005年3月到2006年7月采自田间的样品进行检测,结果表明,2种检测体系都有很好的特异性和准确性;对183个田间柑桔苗木样品带毒率检测结果表明,荧光定量RT-PCR检出率为(82.5%),比常规RT-PCR检出率(73.2%)高.
根據柑桔衰退病毒(CTV)P20基因序列設計cquctv9/cquctv10特異引物對,以柑桔RNA polymeraseⅡ基因作為內參照,建立瞭柑桔衰退病的常規RT-PCR快速檢測體繫;依據柑桔衰退病毒P20基因序列設計cquctv1/cquctv2特異引物對和TaqMan探針cquctvp1,建立瞭柑桔衰退病熒光定量RT-PCR快速檢測體繫.常規RT-PCR檢測下限是含有CTV的50pg總RNA,熒光定量RT-PCR法的檢測下限是2 fg純CTV片段.熒光定量RT-PCR的靈敏度相對比常規RT-PCR高100倍.利用常規RT-PCR和熒光定量RT-PCR體繫對從2005年3月到2006年7月採自田間的樣品進行檢測,結果錶明,2種檢測體繫都有很好的特異性和準確性;對183箇田間柑桔苗木樣品帶毒率檢測結果錶明,熒光定量RT-PCR檢齣率為(82.5%),比常規RT-PCR檢齣率(73.2%)高.
근거감길쇠퇴병독(CTV)P20기인서렬설계cquctv9/cquctv10특이인물대,이감길RNA polymeraseⅡ기인작위내삼조,건립료감길쇠퇴병적상규RT-PCR쾌속검측체계;의거감길쇠퇴병독P20기인서렬설계cquctv1/cquctv2특이인물대화TaqMan탐침cquctvp1,건립료감길쇠퇴병형광정량RT-PCR쾌속검측체계.상규RT-PCR검측하한시함유CTV적50pg총RNA,형광정량RT-PCR법적검측하한시2 fg순CTV편단.형광정량RT-PCR적령민도상대비상규RT-PCR고100배.이용상규RT-PCR화형광정량RT-PCR체계대종2005년3월도2006년7월채자전간적양품진행검측,결과표명,2충검측체계도유흔호적특이성화준학성;대183개전간감길묘목양품대독솔검측결과표명,형광정량RT-PCR검출솔위(82.5%),비상규RT-PCR검출솔(73.2%)고.