CAJ | 학술논문

HIV感染引起的AIDS已经成为严重影响人类健康和社会发展的全球性疾病.酶联免疫吸附试验和免疫印迹检验组合则被认为是HIV检测的"金标准".构建了gp160的抗原多表位融合基因及在原核系统的高表达, 为HIV抗体测定提供特异、价廉的抗原.选定HIV-1 gp160基因中3个片段包含较多抗原表位的区域, 设计带有酶切位点的引物,用PCR的方法从HIV-1HXB2全基因扩增编码这3个片段的基因序列,通过质粒提取、酶切、测序方法鉴定基因片段的正确性, SDS-PAGE和Western blot测定融合蛋白的抗原特异性.构建的HIV-1 gp160多表位嵌合基因的原核表达质粒,酶切和测序结果表明基因序列正确,基因全长969bp.在大肠杆菌BL21(DE3) 中高效表达的重组蛋白分子量为37kDa,以包涵体的形式存在.应用Western blot测定10例正常人和12例HIV/AIDS病人血浆显示HIV-1 gp160多表位融合蛋白具有良好的抗原特异性.成功构建了高表达 HIV-1 gp160多表位蛋白的原核表达系统,纯化的融合蛋白有较强的抗原特异性.
HIV감염인기적AIDS이경성위엄중영향인류건강화사회발전적전구성질병.매련면역흡부시험화면역인적검험조합칙피인위시HIV검측적"금표준".구건료gp160적항원다표위융합기인급재원핵계통적고표체, 위HIV항체측정제공특이、개렴적항원.선정HIV-1 gp160기인중3개편단포함교다항원표위적구역, 설계대유매절위점적인물,용PCR적방법종HIV-1HXB2전기인확증편마저3개편단적기인서렬,통과질립제취、매절、측서방법감정기인편단적정학성, SDS-PAGE화Western blot측정융합단백적항원특이성.구건적HIV-1 gp160다표위감합기인적원핵표체질립,매절화측서결과표명기인서렬정학,기인전장969bp.재대장간균BL21(DE3) 중고효표체적중조단백분자량위37kDa,이포함체적형식존재.응용Western blot측정10례정상인화12례HIV/AIDS병인혈장현시HIV-1 gp160다표위융합단백구유량호적항원특이성.성공구건료고표체 HIV-1 gp160다표위단백적원핵표체계통,순화적융합단백유교강적항원특이성.