中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2009年
11期
51-56
,共6页
廖艳%杨光友%赖松家%喻惠玲%郑晶%古小彬%牟静%安晓雪
廖豔%楊光友%賴鬆傢%喻惠玲%鄭晶%古小彬%牟靜%安曉雪
료염%양광우%뢰송가%유혜령%정정%고소빈%모정%안효설
长毛兔%獭兔%克隆%真核表达%白细胞介素-4
長毛兔%獺兔%剋隆%真覈錶達%白細胞介素-4
장모토%달토%극륭%진핵표체%백세포개소-4
应用反转录 - 聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,在国内首次从ConA诱导培养的长毛兔和獭兔外周血淋巴细胞总RNA中扩增出,IL-4基因.将扩增基因克隆人pMD18-T载体,经序列测定分析表明,长毛兔和獭兔IL-4基因全长均为441bp,两序列间碱基组成无差异(登录号:EF606761和EU639687).长毛兔和獭兔IL-4基因编码147个氨基酸,其中前24个氨基酸组成信号肽,余下的123个氨基酸组成成熟肽.与已报道的犬、猫、人、猪、牛、羊、马、大熊猫和鼠的IL-4核苷酸同源性分别为61.8%、63.4%、69.8%、65.1%、64.1%、64.1%、63.1%、57.0%、60.5%,推导的氨基酸同源性分别为47.2%、50.0%、53.6%、52.1%、48.3%、46.9%、52.1%、43.7%、43.0%.将测序正确的阳性质粒采用脂质体法转染COS-7,用RT-PCR鉴定转染细胞中IL-4基因的表达,并通过MTT法检测到表达的IL-4蛋白具有一定的生物学活性.
應用反轉錄 - 聚閤酶鏈式反應(RT-PCR)技術,在國內首次從ConA誘導培養的長毛兔和獺兔外週血淋巴細胞總RNA中擴增齣,IL-4基因.將擴增基因剋隆人pMD18-T載體,經序列測定分析錶明,長毛兔和獺兔IL-4基因全長均為441bp,兩序列間堿基組成無差異(登錄號:EF606761和EU639687).長毛兔和獺兔IL-4基因編碼147箇氨基痠,其中前24箇氨基痠組成信號肽,餘下的123箇氨基痠組成成熟肽.與已報道的犬、貓、人、豬、牛、羊、馬、大熊貓和鼠的IL-4覈苷痠同源性分彆為61.8%、63.4%、69.8%、65.1%、64.1%、64.1%、63.1%、57.0%、60.5%,推導的氨基痠同源性分彆為47.2%、50.0%、53.6%、52.1%、48.3%、46.9%、52.1%、43.7%、43.0%.將測序正確的暘性質粒採用脂質體法轉染COS-7,用RT-PCR鑒定轉染細胞中IL-4基因的錶達,併通過MTT法檢測到錶達的IL-4蛋白具有一定的生物學活性.
응용반전록 - 취합매련식반응(RT-PCR)기술,재국내수차종ConA유도배양적장모토화달토외주혈림파세포총RNA중확증출,IL-4기인.장확증기인극륭인pMD18-T재체,경서렬측정분석표명,장모토화달토IL-4기인전장균위441bp,량서렬간감기조성무차이(등록호:EF606761화EU639687).장모토화달토IL-4기인편마147개안기산,기중전24개안기산조성신호태,여하적123개안기산조성성숙태.여이보도적견、묘、인、저、우、양、마、대웅묘화서적IL-4핵감산동원성분별위61.8%、63.4%、69.8%、65.1%、64.1%、64.1%、63.1%、57.0%、60.5%,추도적안기산동원성분별위47.2%、50.0%、53.6%、52.1%、48.3%、46.9%、52.1%、43.7%、43.0%.장측서정학적양성질립채용지질체법전염COS-7,용RT-PCR감정전염세포중IL-4기인적표체,병통과MTT법검측도표체적IL-4단백구유일정적생물학활성.
