中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2011年
3期
204-208
,共5页
卡介苗%ESAT-6%抗原提呈%γδT细胞%流式细胞术
卡介苗%ESAT-6%抗原提呈%γδT細胞%流式細胞術
잡개묘%ESAT-6%항원제정%γδT세포%류식세포술
目的:探讨卡介苗(BCG)与ESAT-6激活的人外周血γδT细胞是否具有抗原提呈细胞的表型和功能.方法:用Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞(PBMC)后,经尼龙毛柱法分离获得T细胞.将T细胞分别用卡介苗与ESAT-6刺激扩增γδT细胞后用流式细胞仪分选纯化γδT细胞,并检测其抗原提呈细胞表型.PBMC用贴壁法制备单核细胞后,诱导培养分化为成熟DC细胞,用流式细胞仪检测其成熟程度.T细胞用CFSE标记后分别按四种方法培养:①与结核分枝杆菌分泌性抗原(Mtb-Sag)共同培养;②与Mtb-Sag孵育2小时后的卡介苗激活的γδT细胞共同培养;③与Mtb-Sag孵育2小时后的ESAT-6激活的γδT细胞共同培养;④与Mtb-Sag孵育2小时后的成熟DC细胞共同培养;培养后检测T细胞及CD4+T细胞的增殖情况.结果:卡介苗与ESAT-6激活的γδT细胞CD80、CD86、HLA-DR的表达水平都增加,且后者显著高于前者.卡介苗与ESAT-6激活的γδT细胞培养组的T细胞增殖总数及CD4+T细胞的增殖有所增加;而后者显著高于前者,与成熟DC细胞培养组的增殖情况相似.结论:用卡介苗与ESAT-6激活的人外周血γδT细胞都具有抗原提呈细胞的表型和抗原提呈作用;但后者显著高于前者.
目的:探討卡介苗(BCG)與ESAT-6激活的人外週血γδT細胞是否具有抗原提呈細胞的錶型和功能.方法:用Ficoll密度梯度離心法分離人外週血單箇覈細胞(PBMC)後,經尼龍毛柱法分離穫得T細胞.將T細胞分彆用卡介苗與ESAT-6刺激擴增γδT細胞後用流式細胞儀分選純化γδT細胞,併檢測其抗原提呈細胞錶型.PBMC用貼壁法製備單覈細胞後,誘導培養分化為成熟DC細胞,用流式細胞儀檢測其成熟程度.T細胞用CFSE標記後分彆按四種方法培養:①與結覈分枝桿菌分泌性抗原(Mtb-Sag)共同培養;②與Mtb-Sag孵育2小時後的卡介苗激活的γδT細胞共同培養;③與Mtb-Sag孵育2小時後的ESAT-6激活的γδT細胞共同培養;④與Mtb-Sag孵育2小時後的成熟DC細胞共同培養;培養後檢測T細胞及CD4+T細胞的增殖情況.結果:卡介苗與ESAT-6激活的γδT細胞CD80、CD86、HLA-DR的錶達水平都增加,且後者顯著高于前者.卡介苗與ESAT-6激活的γδT細胞培養組的T細胞增殖總數及CD4+T細胞的增殖有所增加;而後者顯著高于前者,與成熟DC細胞培養組的增殖情況相似.結論:用卡介苗與ESAT-6激活的人外週血γδT細胞都具有抗原提呈細胞的錶型和抗原提呈作用;但後者顯著高于前者.
목적:탐토잡개묘(BCG)여ESAT-6격활적인외주혈γδT세포시부구유항원제정세포적표형화공능.방법:용Ficoll밀도제도리심법분리인외주혈단개핵세포(PBMC)후,경니룡모주법분리획득T세포.장T세포분별용잡개묘여ESAT-6자격확증γδT세포후용류식세포의분선순화γδT세포,병검측기항원제정세포표형.PBMC용첩벽법제비단핵세포후,유도배양분화위성숙DC세포,용류식세포의검측기성숙정도.T세포용CFSE표기후분별안사충방법배양:①여결핵분지간균분비성항원(Mtb-Sag)공동배양;②여Mtb-Sag부육2소시후적잡개묘격활적γδT세포공동배양;③여Mtb-Sag부육2소시후적ESAT-6격활적γδT세포공동배양;④여Mtb-Sag부육2소시후적성숙DC세포공동배양;배양후검측T세포급CD4+T세포적증식정황.결과:잡개묘여ESAT-6격활적γδT세포CD80、CD86、HLA-DR적표체수평도증가,차후자현저고우전자.잡개묘여ESAT-6격활적γδT세포배양조적T세포증식총수급CD4+T세포적증식유소증가;이후자현저고우전자,여성숙DC세포배양조적증식정황상사.결론:용잡개묘여ESAT-6격활적인외주혈γδT세포도구유항원제정세포적표형화항원제정작용;단후자현저고우전자.